单克隆抗体腹水制备实验

免疫学实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

与多克隆抗血清相比，采用单克隆抗体（MAb) 的最主要的优势就是有可能得到大量的特异性单克隆抗体可供应用。MAb 制剂通常包括杂交瘤上清、由接种了杂交瘤的小鼠制备的腹水，以及纯化的 MAb。腹水中包含有高浓度的 MAb，但它不是纯的 MAb 制剂。为得到纯化的制剂，可以把培养上清或腹水拿来进行亲和层析。绝大多数杂交瘤可以长成为腹水瘤。MAb 在这种腹水中的饱和浓度可达 1:500 的滴度。

来源：《精编分子生物学实验指南（第五版）》

来源：丁香实验

操作方法

杂交瘤细胞接种

1. 用 20-G 或 22-G 的注射针，往小鼠腹腔内注射降植烷，每只鼠 0.5～1 ml，1 周后接种细胞。2. 在 175 cm2 培养瓶中加完全 DMEM - 10 / HEPES /丙酮酸钠培养液，进行杂交瘤细胞的培养，使细胞生长至对数期。3. 将培养液转入 50 ml 锥形离心管中，室温下 500 g，离心 5 min。弃上清。4. 细胞重悬于 50 ml 无菌的 PBS 或 HBSS