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科研学霸天团，48小时有问必答

问ls8细胞用氟化钠处理，这个氟化钠是自己配置的还是找厂商买？如果配置用的水是单蒸水还是双蒸水？

dxyc42u

我们实验室都是找厂商买的，自己配置有点麻烦

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问悬浮培养的淋巴细胞总是聚团，是不是状态不好？应如何避免？怎样去除死细胞？

sswei

细胞培养瓶内的细胞出现抱团现象，一般可以从以下几个方面分析： 1、消化的过程可能过于粗暴，吹打太用力，消化太久，消化液太强或有毒性等会导致细胞死亡。细胞死亡后会释放出DNA，缠绕其他细胞，形成黏性的细胞团。2、细胞离心速度过大或时间太长，也容易造成细胞抱团。3、消化不完全的时候，细胞和细胞之间的连接没有分开；消化过度的时候，圆形的细胞容易聚堆，再分开很困难。4、状态不好、老化的细胞，也可能会出现抱

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问如何去除悬浮细胞中的死细胞

huarenqiang5

悬浮细胞死细胞去除方法有流式分选法、磁珠标记法、密度梯度离心法等。1、流式分选法：流式分选法是一种比较传统的分选方法，流式分选法是指可以通过荧光素标记不同的分子，从而通过调节电压等，将悬浮细胞死细胞分离出来。2、磁珠标记法：磁珠标记法是一种结合磁珠抗体去标记细胞的方式，通过磁珠标记法可以将死细胞带上磁珠，从而可以有效的把结合磁珠与没结合磁珠的细胞分离开来，有效筛选出死细胞。3、密度梯度离心法：正常

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问用了污染的血清，细胞状态不好，有什么办法拯救嘛？

huarenqiang5

这种情况只能换用新的好点的没有被污染的血清。

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问有同学养过人子宫内膜基质细胞吗？这个蜕膜化一直不成功。

dxyc42u

细胞状态咋样啊，状态不好也有影响的

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问请问，phostag检测蛋白磷酸化，该怎么对磷酸化的蛋白水平进行定量呢？是用磷酸化条带/总蛋白条带，还是用磷酸化条带/非磷酸化条？

毛利小五郎的徒弟

都可以，但是实际应用中还是磷酸化/总蛋白条带好一些。

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问96孔板 cck8实验加药方式

huarenqiang5

加药的两种方法： 1.把每一个孔的液体吸出来，再把用培养基配好的药加进去。吸液体的时候，把板子倾斜竖起来70°（方便你看），用200μl的枪调最大量程，套一个200μl枪头再套一个10μl枪头，从孔的最低点把液体吸出来。注意不要一下子把整个板的液体全吸出来，因为你加药前还要每一个浓度都混匀，很费时，最好不要让你的细胞空置太久，一般都是半个板地来。

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问cck8 药物稀释 DMSO相关问题

huarenqiang5

小于0.1ul可以忽略DMSO的影响。

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问MCF7传代后数量很少，具体如下

申东熙老伯

MCF7长得挺快的，换好一点的血清，再摸索一下消化条件。

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问关于干细胞成骨分化

huarenqiang5

你只需要按照上面提供的浓度配制就行，不需要考虑体积这个事。

3 回答283 围观

问重金属对血管平滑肌的影响

上山打老虎11111

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问小鼠HE染色皮肤结构组织分析

sswei

皮肤从外到内分为表皮层、真皮层和皮下脂肪层，而表皮层又从外到内可以看到最外层是角质层，角质层下面是颗粒层，颗粒层下面是表皮最厚的棘细胞层，棘细胞层的下面则是基底细胞层。由此可见绿色箭头表示的是表皮层，黄色箭头表示的是角质层。

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问请教小鼠骨髓涂片

loveliufudan

做小鼠骨髓涂片是一项需要经验和技巧的实验操作。以下是一些可能有帮助的建议：骨髓取出后，先加入 PBS 润湿一下，然后用一根细长的注射器将 PBS 慢慢注入骨髓腔，逐渐推出骨髓。这样可以减少骨髓的碎裂，而且注射器的细管可以更容易地抽出小颗粒和碎片。如果骨髓较难推出，可以使用较细的注射器或调整注射器的角度。如果骨髓很难稀释，可以试试先将其挤压几次，使其变得松散。然后使用 P1000 移液器将骨髓取出，

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问可以用紫外线照射sf9昆虫细胞以减少支原体污染吗？

loveliufudan

ST9昆虫细胞的培养过程中可能会出现细菌、真菌或其他微生物污染，其中支原体是一种常见的细菌污染。紫外线照射可以用于减少支原体污染，但它并不总是有效的。支原体是一种比较顽固的微生物，对紫外线辐射的抵抗力比较强，因此需要采用一定的条件和方法才能有效地减少其污染。下面是一些使用紫外线减少支原体污染的常用方法：使用紫外线杀菌器。这种设备可以将细胞培养器放入其中，在紫外线照射下杀死支原体和其他微生物。但是需

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问请问一下，细胞传代一般传到第几代就和原代细胞差别较大了呀？或者说可以从哪些方面判断细胞特性是否改变呢？

loveliufudan

细胞在传代过程中会发生一些改变，这些改变可能包括细胞生长速率的变化、形态特征的改变、细胞表型的变化、基因表达模式的变化等，这些变化会导致细胞特性的改变。一般来说，细胞传代的代数越高，细胞的特性差异越大。一般认为，在进行细胞实验时，可以传代3~15代的细胞使用，但具体传代多少代需要根据不同的细胞系和实验要求来确定。一些细胞系可以传代很多代而不发生明显的改变，而另一些细胞系只能传代很少的代数。判断细胞

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问请问一下，复苏的细胞量太多了，第二天就需要传代，会影响细胞状态吗？

loveliufudan

复苏的细胞数量过多，如果不及时传代，会导致细胞密度过高、营养物质不足、代谢产物积累等，从而影响细胞状态和生长状况。因此，第二天需要传代的情况下，最好不要等到细胞密度过高才进行传代，应尽早进行。细胞密度过高会导致细胞之间竞争养分和空间资源，细胞生长受到限制，细胞进入停滞期或凋亡状态。另外，过高的细胞密度还会增加细胞间的接触和摩擦，增加细胞的损伤和死亡风险。细胞密度过高还会导致代谢产物的积累，如乳酸和

3 回答306 围观

问求助各位老师，3T3-L1脂肪细胞MTT怎么做？用脂肪前细胞和成熟脂肪细胞各做一遍吗？

dxyc42u

脂肪细胞做MTT一般做成熟脂肪细胞就行

3 回答302 围观

问做中药含药血清，如何通过预实验来确定合适的给药剂量呢?

毛利小五郎的徒弟

可以在剂量梯度实验，通过梯度给药得出合适剂量

3 回答1683 围观

问细胞培养的相关问题？

毛利小五郎的徒弟

培养基变黄就是细胞代谢的产物太多了，所以影响细胞培养。

4 回答210 围观

问细胞传代1次之后就开始死亡是为什么？

毛利小五郎的徒弟

可能是营养不够了，建议加血清试一下。

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