悬浮培养的淋巴细胞总是聚团，是不是状态不好？应如何避免？怎样去除死细胞？

细胞培养瓶内的细胞出现抱团现象，一般可以从以下几个方面分析：

1、消化的过程可能过于粗暴，吹打太用力，消化太久，消化液太强或有毒性等会导致细胞死亡。细胞死亡后会释放出DNA，缠绕其他细胞，形成黏性的细胞团。

2、细胞离心速度过大或时间太长，也容易造成细胞抱团。

3、消化不完全的时候，细胞和细胞之间的连接没有分开；消化过度的时候，圆形的细胞容易聚堆，再分开很困难。

4、状态不好、老化的细胞，也可能会出现抱团生长的情况（比如换液不及时、长的太满才传代、污染等造成的细胞状态差）。

5、传代时没有吹打均匀，细胞团多，培养时就会是一团一团的。

6、接种不均匀，或者是细胞未消化开。

7、非震荡培养或细菌（胞）量过多的话就会成团。

通常使用以下几种方法来去除死细胞：

脱落细胞染色：使用一种特殊的染料来识别死细胞，并通过技术进行分离。

质膜抗原染色：使用一种特殊的染料来检测死细胞的质膜抗原，以分离死细胞。

活细胞指数：使用生物活性染料或细胞膜特异性抗原染色试剂，来识别活细胞和死细胞，进而对死细胞进行分离。

抗凝剂：使用抗凝剂来防止细胞凝结，并去除死细胞。

不一定是状态不好，有可能是密度太高了，低速离心的话可以去除死细胞

淋巴细胞在悬浮培养中聚集是正常现象，但如果聚集过于严重可能会影响细胞生长和实验结果的准确性。以下是一些可能导致淋巴细胞聚集的原因以及如何避免的建议：

细胞浓度过高：过高的细胞浓度容易导致细胞聚集。您可以尝试适当降低细胞浓度。

培养条件不适宜：例如温度过高或过低、CO2浓度不足等，这些条件可能会影响细胞的生长和代谢，导致细胞聚集。您可以根据细胞类型和实验要求来调整培养条件，如温度、湿度、CO2浓度等。

细胞粘附性差：一些细胞类型的表面粘附性较差，容易在培养过程中聚集。您可以尝试将细胞在含有一定浓度的凝集素（如ConA）的培养基中培养，这可以帮助细胞聚集。

关于去除死细胞的问题，您可以尝试以下方法：

离心法：将培养液离心沉淀，废弃上清液即可去除死细胞和细胞碎片。

密度梯度离心法：将培养液加入离心管中，然后将离心管放入密度梯度介质中，通过离心分层的方法去除死细胞。

细胞贴壁法：将淋巴细胞在无血清培养基中孵育，死亡的细胞会附着在底部，而活细胞则保持悬浮状态，然后将上清液转移到新的培养皿中。

需要注意的是，去除死细胞的方法可能会影响细胞的健康和状态，因此应谨慎选择方法，并尽量避免对细胞造成损害。