丁香实验
郑丽_nn78
我的thp-1刚复苏出来也会贴壁抱团,后来加了点巯基乙醇之后好点了,等细胞状态好了可以不用加
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THP1生长条件比较苛刻,贴壁应该某些原因导致是分化了,按照我的经验,如下:1、污染,细菌或(和)支原体污染,解决方法:能丢则丢,不能丢的就加双抗或(和)抗支原体试剂;2、培养基pH,相对来说,THP1更喜酸性,解决方法:不用频繁换液,可以采用直接倒细胞悬液再补液 的方法给细胞补充营养;3、细胞密度低,细胞因子浓度低,因为THP1需要自分泌旁分泌等刺激才能生长,解决方法:同2。
丁香实验
我的thp-1前一段时间也出现了类似的问题,当时除了这种细胞,别的细胞状态也不太好。怀疑是污染了。纠结了很久,后来把那一批细胞都扔了,培养液的瓶子也换成了新的(实验室自己配的培养液,自己备瓶子装),复苏了新的细胞。现在thp-1细胞状态很好,背景干净,长的也很快。建议楼主有冻的细胞就复苏新的吧。状态好的时候多冻些
——后面细胞状态可能是您手法问题(主要是血清问题最重要,您列的血清应没问题,要是黄色的血清就不对了)。关于贴壁建议用泛酸钙底的1640可解决,普通1640问题会出现半悬浮半贴别状况,前面顺利,还要注意冻存步骤。这株细胞对冻存也挺挑剔。