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悬浮细胞培养方法求心得

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goingba网友的观点:

悬浮细胞最好养,不用消化,关于几天离一次心,要看你的细胞生长状态了,我养过血液肿瘤细胞,增值比较快。我一般是第二天半量换液(加等量培养基后一分二),第三天若长得比较满,就离心换液。若你不想每天都去管它,你可以把细胞密度中的相对稀一点(不能太稀,太细了细胞不好好长),可以2-3天换一次液(半量,不用离心),这要看细胞状态,和你试验进度,若你急着用细胞,那就将细胞中密一点,天天换液,用胎牛血清,这样细胞会疯长的。要是比较娇气的细胞,象RPMI-8226,一定要用胎牛血清,2-3天半量换液,依据细胞状态再离心换液,等细胞进入对数生长期了,养起来也就好养了。若是正常人T细胞,也要3-5天换一次液,最好3天的时候加入些新培养基,我曾经有一次1周忘了换液(因为T细胞增殖很慢,或者说在体外不给刺激基本不增殖,所以培养基的颜色不发生改变,但他也消耗营养),最后作流式发现细胞大部分凋亡和死亡了。

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