材料与仪器
【试剂】pH4.8~6.0 Tritionx-100的PBS缓冲液,
AO染料:将AO染料溶于含1%TritionX-100的PBS中,终浓度为6μg/ml,含Rnase100μg/ml,避光保存。
【仪器】荧光显微镜
步骤
制备活细胞悬液106 /ml;
取95μl细胞悬液,加5μl的AO染液混合、避光作用10min;
加入5ml PBS,1500r/min离心5min,弃上清,重复洗涤2次;
重悬细胞,吸一滴滴于玻片上并用盖玻片封片;
注意事项
在荧光显微镜下,选用515nm激发光镜检:AO染色细胞DNA呈黄色或黄绿色。当细胞凋亡时,染色呈致密浓染的黄绿色荧光或见黄绿色碎片。
来源:丁香实验