Kimser
MCF7传代后数量很少,每2-4天检查并换液一次,后续最好的结果也只是成团增值,但每个团也是个位数的细胞,再养就会死亡。请问可能是什么原因呢?
申东熙老伯
MCF7长得挺快的,换好一点的血清,再摸索一下消化条件。
sswei
很可能是培养体系不适合细胞(未使用推荐的培养体系);或者消化过度,对细胞有严重影响;或者是传代比例不合适(具有密度依赖性的细胞,传代太稀;或者生长较快的细胞,传代较密,细胞严重堆叠生长)。
huarenqiang5
你这个原因很多,如血清浓度与质量问题,传代等等都有可能。建议:
1.用DMEM培养基,含10%胎牛血清,在37度、5% CO2培养箱中培养。
2.该细胞复苏后贴壁相对较慢,每周2-3次更换新鲜,生长规律性差,很容易不均匀,要注意吹打的充分吹性。
3.传代比例:当细胞培养至细胞 70-80% 的汇合度,即可进行分瓶处理,一般T25培养瓶建议1:2传代,每周可传代2-3次,如果细胞生长速度比正常的时候更慢,可以适当提高血清到20%有利于促进生长。细胞培养时需添加0.01mg/mL 胰岛素。
4..细胞对血清质量要求高,推荐使用优质胎牛血清。
5.细胞消化较快,室温消化即可消化时不要通过敲击或摇晃培养瓶来搅动细胞,以免形成细胞团。
6.细胞生长较快,需及时传代,否则容易导致整瓶细胞漂浮。
bamboopiggy
MCF7 是乳腺癌细胞系,应该是好养的,可能是你细胞数太少了,建议半量换液,然后等成团的细胞数多一些的时候,再重选均匀
loveliufudan
MCF7细胞的数量减少可能是由于以下原因之一:
细胞老化: MCF7细胞是人类乳腺癌细胞系,经过多次传代后,细胞会出现老化现象,导致增殖速度减缓甚至停止。
感染: MCF7细胞在细胞培养过程中容易受到细菌、病毒等微生物的感染,导致细胞死亡。如果您没有使用无菌技术进行培养,则可能会发生这种情况。
细胞质量: MCF7细胞的质量对于细胞的增殖能力有很大的影响。如果您使用了较低质量的MCF7细胞或细胞质量下降,那么细胞的增殖速度将会降低。
培养条件: 细胞培养条件对于MCF7细胞的生长和增殖至关重要。如果培养条件不当,如培养基的温度、PH值、营养物质、CO2浓度、细胞密度等都可能影响细胞的生长和增殖。
建议您重新检查实验室操作流程,尤其是细胞培养条件和无菌技术是否符合标准。同时,建议您尝试不同的培养方法和培养基,寻找最适合您实验的条件,以提高细胞增殖速度和质量。