请教小鼠骨髓涂片
南陆
求教各位同学老师大神😭😭😭怎么能做出合格的小鼠骨髓涂片啊！！
最近在做小鼠骨髓涂片（股骨），试过很多种方法，但有几个难以解决的bug
1.骨髓取出呈半固态，难以推开
2.骨髓取出呈半固态，难以稀释混匀，或者变成散碎的小颗粒，涂片出来就有突然出现的大细胞团
3.骨髓涂片总是看不到红细胞，或者只有很少的红细胞，经常像是红细胞破裂后的残余？（配图）
下面是我用过的几种方法和问题：
1.剪开一段，用pbs润湿过的针头插入骨髓腔，用力推入后抽出——很难抽出骨髓，抽出的一点也会碎碎的卡在针头和注射器借口的缝隙那里，也打不出来到玻片上
如果加大残留的pbs量，直接抽或者推一点再抽，能看到混浊的白色液体，但是涂片看不到红细胞 救救
2.剪开两段，pbs冲出，取较完整的红色骨髓团块——也是半固态，推片难以推开
3.血清滴在载玻片，再将骨髓挤出——骨髓很难挤出，股骨夹裂了也没有溢出的骨髓，都粘附在骨髓腔内壁；用针尖挑出来，也是半固态的很难稀释推开
求教各位做过的同学老师大神😭😭😭😭怎么能做出小鼠骨髓涂片啊！！
3 个回答
sswei
由于骨髓液中含有较多纤维蛋白原，易于凝固，可于骨髓液中加入稀释5一10倍鸡蛋清，充分混匀，再取后涂片。
毛利小五郎的徒弟
骨髓属于高度亲脂，可以加用有机溶剂溶解。
loveliufudan
做小鼠骨髓涂片是一项需要经验和技巧的实验操作。以下是一些可能有帮助的建议：
骨髓取出后，先加入 PBS 润湿一下，然后用一根细长的注射器将 PBS 慢慢注入骨髓腔，逐渐推出骨髓。这样可以减少骨髓的碎裂，而且注射器的细管可以更容易地抽出小颗粒和碎片。如果骨髓较难推出，可以使用较细的注射器或调整注射器的角度。
如果骨髓很难稀释，可以试试先将其挤压几次，使其变得松散。然后使用 P1000 移液器将骨髓取出，然后加入 PBS，将其混匀。使用 P200 移液器加入一滴至两滴骨髓悬液到载玻片上，用 P200 移液器快速移动，使其均匀涂开。
在做涂片时，如果看不到红细胞或只有很少的红细胞，可以尝试在取出骨髓时添加抗凝剂，如 EDTA 或肝素，以避免红细胞的破裂。另外，如果样品存储或处理不当，也可能会导致红细胞的破裂。
另外，注意使用新鲜的 PBS 和材料，避免污染。
