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科研学霸天团,48小时有问必答
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电感耦合等离子质谱仪
sswei
粉末/块状样品一般提供100mg以上。
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WB电泳-溴芬兰跑出3条带
毛利小五郎的徒弟
样本考虑有降解,重新纯化样本再跑
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酵母单杂交相关求助!
dxy_rbusixu0
你好 请问你最后转化成功了吗 你的质粒浓度是多少呀
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R语言用psm构建完nomogram后画校准曲线时报错
loveliufudan
根据您提供的代码,您可能是因为没有正确调用survest.psm()函数,导致在进行预测生存曲线时出现了错误。可以尝试以下更改代码:#nomogram构建rm(list=Is())library (Hmisc)library (grid)library(lattice)library (Formula)library (ggplot2)library(rms)library (survival)l
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问
LPS诱导炎症模型用于后期实验 是先做转染还是先诱导炎症
loveliufudan
在进行LPS诱导炎症模型后期实验时,一般的操作步骤是先诱导炎症,然后进行转染。这是因为LPS诱导炎症是一种化学物质处理的方式,能够诱导机体产生炎症反应,从而模拟实际的疾病情况,这是实验的基础。而转染则是在诱导炎症后对细胞进行基因转染,用于检测某些基因在炎症反应中的作用。具体而言,实验步骤可以如下进行:培养待处理的细胞系。给细胞系加入LPS,使其产生炎症反应。在产生炎症反应的同时,进行转染实验,将感
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R语言的cox预测模型的校准曲线
loveliufudan
似乎是在 calibrate 函数的调用中出现了问题。具体来说,错误信息中提示说您必须在原始拟合函数中指定 x=T 和 y=T,但是在您的代码中并没有明确指定这些参数。因此,您需要检查以下几点:在 cph 函数的调用中,您是否明确指定了 x=T 和 y=T。这两个参数分别指定是否返回风险比例和生存概率,是 calibrate 函数需要的参数之一。检查 calibrate 函数的调用中是否有语法错误
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问
高效液相色谱等度能出峰,梯度没峰的原因,是混合比例阀的问题吗,需要怎么排查?
毛利小五郎的徒弟
可以取一组已知比例的样品,然后加样验证,如果条带不佳可能是比例阀的问题
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问
做coip时候,ip后目的条带比input的条带高怎么解决。
毛利小五郎的徒弟
1、排除IP条带不是IgG的重链和轻链。2、排除一抗或者二抗没有污染,一般用新配的抗体理论上说IP的条带要和Input的一样。3、把核酸消解就会变正常。
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问
如果一个样品的浓度很低,我可以取同组多只样本一起进行提取吗?
毛利小五郎的徒弟
可以的,一起提取提高提取量。或者分开提取后混合
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蛋白互作-免疫共沉淀
sswei
蛋白质-蛋白质相互作用是指两个或两个以上的蛋白质分子通过非共价键形成 蛋白质复合体的过程。蛋白质与蛋白质之间的相互作用构成了细胞生化反应网络的一个主要组成部分,对调控细胞及其信号有重要意义。蛋白质互作研究按照实验目的可分为两大类,一是验证两个蛋白是否存在相互作用,二是筛选某个兴趣蛋白的互作蛋白。据此是可以通过共价键形成ABC蛋白。
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RIPA提蛋白!
毛利小五郎的徒弟
一般不会改变蛋白结构,但是在提取过程中理化性质改变也会引起蛋白降解
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血清TG
毛利小五郎的徒弟
先检查模型是否造模成功,然后调整药量做三次,看结果差异
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问
慢病毒转导之后传代问题
sswei
首先,确定病毒是否有支原体或细菌污染;其次,确定病毒感染MOI是否过高,梯度稀释后感染,寻找合适的MOI。同时考虑目的细胞可能比较敏感,更换其它细胞感染确定病毒是否有问题。病毒对某些敏感细胞有毒性可能是不可避免的。如果以上都排除后细胞状态仍然不好,尝试增加血清含量,观察细胞状态是否好转。
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abcam的抗体说明书上观察到的分子量是33,我跑的都在42,文献里别人用sigma或者其他抗体条带也在42,我跑的能不能用啊?呢
loveliufudan
抗体说明书中提到的分子量是供参考的,它是由厂家或供应商提供的建议值,可能会因为生产批次或其他因素而略有不同。因此,在实验中,您应该以您的实验结果为准,而不是仅依赖于说明书提供的参考值。在您的实验中,您得到的蛋白质大小为42 kDa,而在其他人的实验中,他们使用的抗体或其他试剂得到的蛋白质大小也为42 kDa。这表明您的实验结果与其他人的实验结果一致,并且与文献报道的结果相符合。因此,您可以使用您的
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Graphpad prism 比较两组数据(两个样本)之间的显著性差异怎么比,wb条带明显有差异,但为什么试了一下没有差异性
菊与刀刀
显著性差异要有样本平均值才能比,每组一个样本比不了
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WB实验转膜过程中出现以下这种问题?
毛利小五郎的徒弟
可能是存在移位或者重叠,建议不要一起转,分开转就不会这样了。
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WB条带中间空白,两边有信号,是什么原因呢
huarenqiang5
wb条带中间有空白的原因是过高的蛋白上样量或一抗和二抗浓度过高都会促使底物过快的消耗导致。
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请问这种泳道内部背景很黑是啥原因呢?跑了好几次都这样😭抗体是新配制的,用的是半干转20伏28分钟
sswei
背景黑可能有以下几个原因:1.没有封闭好,但这个可能很小2.一抗浓度太高,适当降低增加一抗稀释比例3.二抗孵育时间太长,一般室温45min,二抗切不可孵育时间太长
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热蛋白组学实验裂解细胞,可以用Rapigest SF吗?
毛利小五郎的徒弟
裂解剂一般还是要选择NP-40,Rapigest SF注意作用是表面活性剂,增强表面活性
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问
小鼠免疫相关问题求教
洛噜啦噜啦嘞
首先,细胞免疫效果取决于抗原。正常情况下皮下接种,背部皮下即可。接种成功,其实,我们看的是一段时间之后,接种位置处是否出现溃烂,即表明有炎症产生,当然,并不是所有的免疫接种都会出现这种情况。
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