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做coip时候,ip后目的条带比input的条带高怎么解决。

相关实验:免疫共沉淀(Co-IP)

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步伐行人


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4 个回答

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

1、排除IP条带不是IgG的重链和轻链。

2、排除一抗或者二抗没有污染,一般用新配的抗体理论上说IP的条带要和Input的一样。

3、把核酸消解就会变正常。

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sswei

有帮助

IP的蛋白上移有可能是因为蛋白结合了核酸,增加了分子量。用MNase消解,RNA和DNA都可以被这个酶消解掉。

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loveliufudan

有帮助

解决这个问题的方法是调整 COIP 参数。具体来说,您可以调整目标条带的权重,以使其与输入条带更加平衡。这可以通过在 COIP 中使用权重参数来完成,例如调整目标条带的权重,使其与输入条带具有相似的重要性。这可能需要对参数进行试验和调整,以获得最佳的结果。

此外,如果 COIP 输出的结果并不理想,您可能需要考虑调整整个图像处理流程的参数,以确保产生最佳的结果。

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huarenqiang5

有帮助

主要考虑以下原因及建议:

1、排除IP条带不是lgG的重链和轻链。

2、排除一抗或者二抗没有污染,一般用新配的抗体理论上说IP的条带要和Input的一样。

3、把核酸消解就会变正常。

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