土井挞克树
样本考虑有降解,重新纯化样本再跑
sswei
溴酚蓝的分子量比蛋白小很多,跑得比蛋白快,出现分层是因为溴酚蓝里面的不同成分,不会影响蛋白。
loveliufudan
出现多条带的原因可能有很多,以下是一些可能导致问题的原因:
样品中存在多个同源蛋白,比如在转染过程中,细胞表达的同源蛋白可能被同时检测到。
样品含有不同修饰的同源蛋白,比如磷酸化、甲基化等,导致不同带位移。
样品中存在剪切变异,导致产生多个蛋白带。
染料太浓或者光照不均匀,导致图像过曝或者欠曝,出现多条带。
孔位可能被污染或者重叠,导致同一个孔位出现多个带。
为了确定问题的原因,可以尝试以下几种方法:
对不同条件下的样品进行处理,比如不同的抗体、不同的孔位、不同的电泳条件等,以检测到是否存在多条带。
调整电泳条件,如电压、电流、电泳时间、堆积胶的比例等。
尝试使用不同浓度的染料和发展液。
检查样品制备和电泳的过程是否出现污染和错误,如洗涤不彻底、沉淀不完整等。
确保孔位不重叠,并且正确注射样品。
综上所述,WB电泳出现多条带可能由多种原因导致,需要根据具体情况进行排除。
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