balalaLy
有几个质粒,一个是找公司合成的质粒,其它是从普通菌株里面提取的质粒,现在想将这些质粒通过电转方式转导进另一个菌里面,自己制备的该种菌株的感受态,电转了好几批,要么电转后涂板不长,要么只零星长几个克隆,但克隆菌p、测序都不对。咋整?
dxy_g9y5gije
首先你考虑一下感受态细胞有没有问题,考虑转其它成功过的质粒尝试
其次考虑一下其他转导方式比如说化学转导
天一湖医者
很可能是你细胞没有做好。你可以重新做一下细胞。
bamboopiggy
你都做成感受态了,直接转不就行了?为啥还要再电细胞一下啊?
Junego
1.自制的电转化感受态有没有评价过转化效率?
2.转化的质粒有没有问题?有没有对照组?
3.能否通过化学转化小试一下?
4.电转化需要样品脱盐处理,可以乙醇沉淀一下。