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科研学霸天团，48小时有问必答

问想问大家，共培养模型和transwell小室具体是什么区分？

loveliufudan

共培养模型和Transwell小室是两种不同的细胞培养方式。共培养模型是在同一个培养容器中同时培养两种或多种细胞类型。在共培养中，细胞可以直接接触，相互作用，并在相同的环境中生长。这种方式在研究细胞间相互作用和相互信号传导方面非常有用。Transwell小室是一种阻隔性细胞培养方式，其中细胞生长在一个透明的细胞培养膜上，形成一个活细胞膜。这种方法用于研究细胞间的通透性和细胞间的通讯，也可用于研究细

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问大鼠是否需要禁食取粪便，代谢组学

毛利小五郎的徒弟

建议禁食后取粪便，排除进食的影响。

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问脂肪乳注射液的滤膜选择

龙大人驾到

通常在做HPLC分析时，脂肪乳注射液试剂都需要经过过滤，以确保试剂质量和准确性。在选择滤膜时，一般建议选用有机系滤膜，因为脂肪乳注射液试剂本身是有机溶剂系的，使用有机系滤膜可以有效避免试剂的反渗透。但是还是要根据具体的试剂和分析要求来决定使用哪种滤膜，以保证最佳的分析结果。

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问所克的基因的CDs为950bp左右，上下游引物的Tm值为56.4—59.9，用Taq酶克，试了多个温度梯度克不出来，求合适的温度

龙大人驾到

Taq DNA酶的活性范围一般介于55-72℃，温度过低、过高都会对酶绒毛发挥作用产生不利影响，因此应选择合适的温度，分子量较大的基因应优先选择较高的温度，而对于950bp左右的基因，选择合适的温度一般应保持在62-65℃，以便获得最佳的PCR扩增效果。

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问引物探针检测低浓度样本不稳定，并且检测浓度与真实浓度相比忽高忽低，这种情况下该如何优化？使反应体系更稳定。

毛利小五郎的徒弟

增加稳定剂，选用成熟的试剂会稳定体系。

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问实验操作求助

毛利小五郎的徒弟

是的，配方中的甲醇是指无水甲醇。

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问sci查重需要将参考文献作为文本放入文章结尾吗？以及表格中的备注需要一并查重吗，谢

毛利小五郎的徒弟

需要的，参考文献不纳入查重范围

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问保护性因素和危险因素联合做二元logistic回归和roc曲线该怎么做？

毛利小五郎的徒弟

不建议直接做roc曲线，roc在截止值的特异度预测还不错，但是之外的预测率可仅供参考

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问期刊推荐求助

毛利小五郎的徒弟

Journal of Cystic Fibrosis这个不错

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问请问各位大佬，药学的什么期刊什么类型比较好投，论文小白

龙大人驾到

"British Journal of Clinical Pharmacology"，"Journal of Pharmaceutical Sciences"，"Pharmacology & Therapeutics"

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问NCBI里面怎么搜一种菌的所有信号肽

龙大人驾到

访问 NCBI 的官网（www.ncbi.nlm.nih.gov）。点击顶部的“搜索”标签，然后在搜索框中输入该菌的完整名称或简称。选择“生物序列”作为搜索类型，然后点击“搜索”按钮。筛选结果，找到该菌的基因组数据库。进入该基因组数据库，查看该菌所有基因的列表。使用“信号肽”作为关键词在基因列表中搜索，找到所有包含信号肽的基因。查看每个基因的序列详细信息，提取信号肽序列。如果没有找到满足要求的信息

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问蛋白标签

龙大人驾到

可能有如下几方面的问题蛋白质表达水平过低：如果蛋白质的表达水平很低，那么Flag标签就可能很难被检测到。1.Flag抗体效仿不足：Flag抗体可能不够敏感，导致Flag标签没有被检测到。2.Flag标签不稳定：Flag标签在表达和纯化过程中可能不稳定，导致在Western blot实验中没有被检测到。3.Western blot技术问题：有可能是技术问题，例如抗体稀释比例不合适，板材过于热或者环境

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问求助想验证多糖和细胞膜上蛋白结合可以用什么方法

龙大人驾到

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问【SOS】转染实验实在是搞不出来😭

毛利小五郎的徒弟

你的试剂没有问题，考虑还是时间不合适，可以验证一下时间的适应性。

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问小鼠光遗传病毒注射？正常病毒和cre病毒的区别

loveliufudan

正常病毒和cre病毒的区别在于cre病毒通过把某些特定基因的表达删除，用于调控特定基因的表达。相比之下，正常病毒是在细胞中直接表达某个基因，不需要进行其他的基因操作。两种方法的区别在于，第一种方法是直接对普通C57小鼠注射，第二种方法则先对小鼠进行了一次基因调控操作。因此，第二种方法更灵活，可以在表达的基础上进行更多的操作，但同时也更复杂。

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问求助各位大神过氧化氢诱导细胞衰老模型怎么构建？用200uM刺激4h培养24h，b-半乳糖苷酶未染上色

龙大人驾到

构建过氧化氢诱导细胞衰老模型的方法如下：1.细胞培养：选择需要研究的细胞株，并在培养皿中进行细胞培养。2.添加过氧化氢：在培养液中添加适量的过氧化氢（通常为200 μM），然后用于刺激细胞4小时。3.细胞观察：在刺激后1天，观察细胞的生长情况，并进行相关的实验操作。对于b-半乳糖苷酶未染上色的情况，可能是由于染色方法不正确或染色时间过短造成的。也有可能是由于细胞衰老的过程影响了b-半乳糖苷酶的表达

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问分子实验两复孔具有可靠性吗

loveliufudan

一般来说，三复孔实验比双复孔实验更加可靠，因为它提供了三个独立的数据点，以降低实验误差。在双复孔实验中，仅有两个数据点，因此实验误差较大，可靠性较低。如果您仅使用双复孔实验，可以考虑重复实验以确保实验结果的可靠性。您也可以使用外标法对结果进行校正。如果您需要最大程度地提高实验结果的可靠性，建议您使用三复孔实验。请注意，实验条件（如样品类型、实验材料、仪器设备等）以及操作技巧也可能影响实验结果的可靠

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问不同曲线如何比较差异性

Dr_劉医生

直接做A、B因素曲线的ROC分析，对比灵敏度和特异度，

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问置信区间如何获得

Dr_劉医生

置信区间和p值是同时给出的，用统计软件算出

3 回答124 围观

问军事护理（解放军护理杂志）

Dr_劉医生

是的，只要送了外审就会给意见的

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