实验动物技术

粥样硬化型心血管疾病（Atherosclerotic cardiovascular disease，CVD)是当前人类面临的主要致死性疾病之一，也是当前心血管疾病研究热点，动物实验是研究和探索治疗心血管疾病途径必不可少的环节。常见动脉粥样硬化动物模型包括Apoe敲除小鼠、Ldlr敲除小鼠、在其基础上调控其他基因的品系以及其他基因调控方式调控相关基因的动物模型（表1）。表1.不同动脉粥样硬化小鼠对比Pcsk9D377Y ...

小鼠体外受精过程中被最容易被忽略的3个影响因素体外受精(In Vitro Fertilization)是指哺乳动物的精子和卵子在体外人工控制的环境中完成受精过程的技术，英文简称为IVF。小吉今天就和大家分享下在小鼠体外受精过程中最容易被忽略的3个实验影响因素。因素一：你对实验的品系了解吗？体外受精目前基本适用于各个背景小鼠，但是其受精率随着品系的不同，会有所差异，甚至是比较大的差异，如NOD背景小鼠，其在超排后卵子异 ...

Western Blot 实验 通过SDS-PAGE胶将不同的分子量的蛋白分离开，将目标蛋白转移到PVDF膜上，再利用抗原抗体的特异性结合，用特异性的一抗结合目标蛋白，用HRP标记的二抗结合一抗，再加以ECL发光液显色，检测目的蛋白在不同处理的样本中表达量的高低变化服务优势及实验服务流程：1、利用高性能试剂配合高通量全自动western blot机，提供超高灵敏性的western blot实验服务。超高灵敏度最低至15飞克抗原。 ...

实验动物基础知识之实验常用大小鼠实验动物小课堂开课啦~~实验用小鼠01、C57BL/6小鼠来源： 1921年立特(Little)用艾比·拉特洛坡(Abby Lathrop)的小鼠株，雌鼠57号与雄鼠52号交配而得C57BL，将毛色呈黑色的进行固定，培育成的产物。1937年Little将维持的C57BL第六组亚系定名为C57BL/6，将第十组亚系定名为C57BL/10，继而分别维持至今。1985年从日本实验动物中央研究所引引 ...

心肌缺血再灌注模型： 心肌缺血是指心脏血液灌注减少，导致心脏供氧减少，心肌能量代谢不正常，不能支持心脏正常工作的一种病理状态。冠心病是临床常见的缺血性心脏病，是指冠状动脉发生粥样硬化引起管腔狭窄或闭塞，导致心肌缺血缺氧或坏死而引起的心脏病，临床以血运重建治疗为主。然而，目前大量研究结果显示，缺血心肌组织恢复血流供应后，心肌受损程度仍可能进一步加重，对心肌造成二次损害，缺血再灌注（I/R）损伤心肌可占全部梗死心肌面积的 ...

脑卒中是由于脑部血管突然破裂或因血管阻塞导致血液不能流入大脑而引起脑组织损伤的一组疾病。中医上称之为“中风”。由于其发病率高、死亡率高、致残率高、复发率高及并发症多的特点，使用医学界把它同冠心病、癌症并列为危害人类健康的三大疾病之一。为什么脑卒中被称之为“中风”? 因发病急骤，症见多端，病情变化迅速，与风之善行数变特点相似，故名中风、卒中。1.症状 脑卒中最常见症状为一侧脸部、手臂或腿部突然感到无力，猝然昏扑、不省人事，其他症状 ...

癌症已经成为影响人类健康的重要疾病，发病率呈现逐年上升趋势，癌症研究领域中公认的缺陷之一是缺乏能够研究癌变和癌症治疗的模型系统。在过去的几十年中，抗肿瘤治疗药物的研发呈现爆炸式的增长，但是绝大多数新疗法都不能顺利通过III期临床试验，其主要原因就是缺乏合适的体内模型。我们常用的人类肿瘤细胞系或患者源性肿瘤移植到免疫缺陷小鼠体内的肿瘤动物模型，使用人类肿瘤细胞系建立的动物模型称作肿瘤细胞系异种移植模型（Ca ...

恶性肿瘤的主要生物学特性之一是转移性，建立与临床表现相近的动物模型是研究的关键环节。人体肿瘤移植于裸小鼠建立人癌异种移植动物模型为深入研究提供了可能。原位移植可为人体肿瘤生长提供相似的微环境，更利于肿瘤恶性行为的表现，因此，大多采用原位移植的方法建立肿瘤转移动物模型。 根据我们多年的肿瘤模型构建经验，为大家介绍几种我们常遇到的几种肿瘤模型构建方法，以供参考。一、人肝癌原位移植模型 将人肝癌细胞株（如：HepG2等）传代 ...

小鼠视网膜铺片及免疫荧光染色 在研究血管性视网膜疾病时，由于小鼠眼球较小，不便于进行眼底血管的直接观察。病理切片染色是诊断及评判的金标准，但该方法只能观察切面形态。视网膜铺片是研究血管性视网膜疾病的常用方法。下面介绍详细操作流程：第一步：心脏灌流固定小鼠麻醉后，仰卧位固定小鼠四肢, 剪开胸腔，充分暴露心脏，在心尖左旁2 mm处用输液针头刺入并剪开右心耳, 迅速灌注生理盐水100mL, 肝肠变白表明灌注成功, 旋转输液开关, 再灌入多聚甲醛溶 ...

根据我们多年来进行实验研究的体会，积累有关正常实验动物的各种生物学数据资料是很有实用价值的。现将我们实验室积累的资料和有关文献上的资料加以汇总，编制成表，按正常实验动物一般生物学数据、生理学数据、生化学数据和脏器重量、长度及其他数据等顺序排列。常见实验动物的生物血数据参考值--大小鼠小鼠大鼠成年体重♂20～40♂200～280（g）♀18～35♀180～250寿命（年）2～43～5染色体2n=402n=42体温（℃）37～37 ...

骨质疏松动物模型及卵巢切除术 骨质疏松是指全身性骨量减少及骨组织微结构改变，骨密度和骨质量降低，从而引起骨强度下降和骨脆性增加，导致极易发生骨折的一种常见的和全身性的骨代谢疾病。其症状表现为疼痛，主要，以腰背痛最为多见，其次是身长缩短、驼背，严重者可见骨折。 骨质疏松动物模型的制备方法较多，涉及的实验动物种类也很多，最常用的方法是雌性大鼠卵巢切除后诱发骨质疏松动物模型。其机理是模拟人类女性绝经后雌激素缺乏导致骨代谢紊 ...

发展现状 骨缺损是由于严重创伤、感染、骨肿瘤切除及各种先天性疾病等原因导致的骨结构完整性破坏，是目前骨科疾病领域一大挑战。兔构建骨缺损模型是目前骨组织工程学研究的常用方法。与大小鼠等啮齿类动物不同，兔具有与人类相似的骨骼哈弗氏系统，骨架大小适中，便于手术操作，且相对于犬、小型猪等大动物成本低。下面介绍骨缺损模型构建方法及要点：一、实验动物选择：实验兔年龄的选择是后期骨缺损愈合状况的一个重要因素。新西兰兔在18~20周 ...

急性肾损伤（acute kidney injury，AKI）是临床上较为常见的急危重病症之一，常见于大手术后、创（烧）伤、危重病等患者中，可导致患者电解质紊乱、酸中毒及容量负荷过重，并最终可发展成为尿毒症。 肾缺血再灌注（renal ischemiareperfusion，RIR）损伤是由各种原因导致的肾脏灌注不足所致，伴随着一系列连贯的细胞事件发生，包括活性氧(ROS)释放、凋亡、坏死、炎症细胞的浸润和活性介质的释放，从而导致组织损伤 ...

动脉粥样硬化是一种长期、复杂的血管病变。在其研究过程中，有一种损伤反应假说，即：脂质浸润和内皮损伤是产生粥样硬化病变最基本条件，粥样硬化形成的起始阶段是血管内皮细胞的功能障碍，而血管内膜受损可以加快其的形成。常用的方法是球囊拉伤法，其主要原理是造成血管内膜损伤，进而引发一系列的炎症反应和内膜反应，最终形成动脉粥样硬化。在这种方法中，脂喂养造成的动物高脂血症是引起动脉粥样硬化的基础；而各种方法导致内膜损伤，加快了 ...

关于剂量换算的问题，作为学习过药理的相关人士来说再熟悉不过了，而对于那些从事动物实验的非药理专业的人士来说不同实验动物之间或者实验动物与人之间的剂量如何作“等效”换算是一个很棘手的问题。我们在实验中估算一种药物或化合物的使用剂量的时候，通常采用这三种方法：1、查文献，用现成的数据；2、依其他动物数据进行换算；3、通过半数致死量LD50摸索；关于动物给药剂量的计算，起初人们以为是直接按体重比计算剂量就可以了，这种办 ...

动物实验基本操作一、小鼠的抓取保定技术我们在做动物实验时，小鼠抓取是最基础的第一步。该动作虽看似简单，但若操作不当，要么小鼠咬伤自己，要么给药时对小鼠造成伤害或死亡，影响实验结果和项目进度。那么，应该怎样正确操作呢？抓取方法：习惯用右手者，先用右手将小鼠从笼盒内抓出，捏住尾巴中部或根部拎起放在手上，让小鼠放松；右手抓取小鼠，将小鼠放在笼盖上，轻轻向后拉鼠尾，小鼠会出于逃脱本能抓住笼盖使身体出于完全伸展状态，顺势用左 ...

慢性不可预知性温和应激致抑郁症动物模型抑郁症（depression）是一种伴随行为学改变、神经系统改变和其他生理病理变化的心身障碍性疾病，主要以 情绪低落、兴趣丧失、思维迟缓为主要特征，严重者有自杀念头及行为。慢性不可预知性温和应激（chronic unpredictable mild stress，CUMS）造模方法目前已被广泛应用于抑郁症研究，该方法造模所引起的模型动物病理生理改变与人类抑郁症相似。建模方法：1，慢性不可预 ...

小鼠脊髓/背根神经节快速取材器械准备：体视显微镜、显微剪、显微镊、培养皿、5ml注射器脊髓取材：1.小鼠致死麻醉量麻醉2.酒精喷洒/浸泡消毒3.背部皮肤开口、头尾双向撕开4.确保无毛发粘连污染5.找到需取材脊髓段，整段取出6.剔除脊柱2侧肌肉7.5ml注射器吸入培养基3ml8.去针头注射器贴合断面9.稍微用力推压可吹出脊髓10.遵循尾髓至颈髓方向推压，避免脊髓形态破坏（病理检测）DRG取材：1.显微剪剪开锥管2.椎间孔双侧 ...

长期以来，国内外的研究已经充分证明高盐饮食（氯化钠）与高血压有关。高血压会增加患心脏病、中风、肾衰竭和其他健康问题的风险。研究也将盐的摄入与大脑健康联系起来，但其相关机制尚不清楚。由威尔康奈尔医学院的 Costantino 博士领导的一个研究小组开始探索高盐饮食和大脑功能之间的联系，他们给小鼠喂食的高盐饲料中氯化钠的含量是通常氯化钠含量的 16 倍。研究小组估计，这一水平与摄入过多盐的人类相似。该项研究的结果发表在 2018 年 1 月 15 日的《 ...

炎症性肠病 (IBD) 以肠慢性炎症为特征，主要包括溃疡性结肠炎和克罗恩病。在西方国家，估计有 1/1000 的人患有 IBD。虽然 IBD 与遗传易感性有关，但也发现这种疾病受到环境因素的影响。流行病学研究已经将西方的高脂肪饮食与 IBD 联系起来，此外，过去的几十年内，全世界的发病率都在增加，这可能部分归因于发展中国家饮食习惯的改变。临床证据表明，高脂肪饮食和肥胖可能会增加 IBD 的风险。在临床中，体重指数 (BMI) 高的患者表现出更严重的症状，患者住院需求 ...