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骨质疏松动物模型及卵巢切除术

北京永欣康泰科技发展有限公司

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骨质疏松动物模型及卵巢切除术
   
       骨质疏松是指全身性骨量减少及骨组织微结构改变,骨密度和骨质量降低,从而引起骨强度下降和骨脆性增加,导致极易发生骨折的一种常见的和全身性的骨代谢疾病。其症状表现为疼痛,主要,以腰背痛最为多见,其次是身长缩短、驼背,严重者可见骨折。
       骨质疏松动物模型的制备方法较多,涉及的实验动物种类也很多,最常用的方法是雌性大鼠卵巢切除后诱发骨质疏松动物模型。其机理是模拟人类女性绝经后雌激素缺乏导致骨代谢紊乱所致的骨质疏松症状。
 
模型制备方法
        
实验动物选择7-9月龄的雌性SD或Wistar大鼠(大鼠月龄越大,其病理表现越接近成年人疾病特点)。
        动物麻醉后,取仰卧位固定。腹部备皮、消毒、铺洞巾。以腹正中线距阴道口3.5cm 处为切口,向下切开皮肤1.5-2cm,钝性分离皮下组织,切开肌层、腹膜,打开腹腔。拨开脂肪层找到子宫(膀胱背侧),沿着输卵管轻柔拉出,其末端可见脂肪包裹呈粉红色桑葚状的卵巢,用组织钳夹闭卵巢下输卵管,将输卵管结扎,剪除卵巢,将断端输卵管送回腹腔,同样方法去除另一侧卵巢。逐层缝合肌肉、皮肤,用碘伏再次消毒皮肤缝合口。术后每天予以青霉素40000 IU注射1周。大鼠行卵巢切除术后恢复1周,予以地塞米松1mg/kg,每周2次,给药4-6周即可成模。

模型评价方法:

  骨密度测定:

       双能X射线吸收法,测定骨密度和骨矿物盐含量。

       CT,对骨局部及骨小梁单元进行分析,分析骨连接性和弹性,测定松质骨和皮质骨的变化,以及股质量的变化。
       MRI,评价骨髓水分和脂肪的变化,反映骨小梁结构的改变。

骨生物力学测定:
      长骨3点弯曲、4 点弯曲和旋转实验,以及椎体骨抗压强度及破坏载荷等。
病理、免疫组化、Tunel等。

生物化学指标检测:
       骨形成指标:碱性磷酸酶和骨钙素等;骨吸收指标:抗酒石酸酸性磷酸酶和Ⅰ型胶原氨基端交联肽等。

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