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兔骨缺损模型构建方法

北京永欣康泰科技发展有限公司

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发展现状
      骨缺损是由于严重创伤、感染、骨肿瘤切除及各种先天性疾病等原因导致的骨结构完整性破坏,是目前骨科疾病领域一大挑战。兔构建骨缺损模型是目前骨组织工程学研究的常用方法。与大小鼠等啮齿类动物不同,兔具有与人类相似的骨骼哈弗氏系统,骨架大小适中,便于手术操作,且相对于犬、小型猪等大动物成本低。

下面介绍骨缺损模型构建方法及要点:

一、实验动物选择:
  
实验兔年龄的选择是后期骨缺损愈合状况的一个重要因素。新西兰兔在18~20周龄时达到青春期,20周以后骨骼基本停止生长。目前大多数研究采用6~9月龄雄性兔作为实验动物。

二、缺损部位:
  
选择哪个部位骨组织缺损会影响到后期实验结果及检测方法的选择。选择最多的部位主要有桡骨、股骨、胫骨等。桡骨缺损操作性较强,是因为桡骨与尺骨游离(见下图),缺损时可直接切断桡骨,且由于前肢不负重,基本不存在骨折的风险,后期X光检测也较为方便。股骨缺损手术难度略大,锯骨时不易发力,且后期X光检测时不易摆体位。胫骨是负重骨,缺损后极易发生骨折,尤其是在麻醉苏醒期需特别注意。
三、造模方法:(以桡骨缺损为例)
       动物麻醉后,术部备皮,碘伏、酒精消毒皮肤,铺洞巾。于前肢中段前内侧作长2~3cm纵形切口,逐层分离浅深筋膜,避开或结扎前臂贵要静脉。
        牵开肱桡肌及桡侧腕屈肌可见桡骨骨膜,纵向切开骨膜,用骨膜剥离器将骨膜向两侧推开,充分暴露桡骨中段,用两个骨膜剥离器撑开两侧皮肤、肌肉及血管,用特制电锯截骨制作15mm骨缺损,用纱布填塞缺损区止血。


     依次用双氧水、碘伏、生理盐水冲洗骨缺损区,彻底清创,逐层严密缝合深浅筋膜及皮肤。术中及术后均不作固定,动物分笼饲养,术后连续3d 40万U青霉素肌注预防感染。
四、模型评价方法:
     X光片观察缺损愈合状况、计算骨痂面积;

手术操作要点:
       手术开口位置很关键,这关系到缺损部位是否均一,更重要的一点是一定要避开贵要静脉。暴露贵要静脉后将其推至电锯着力点的背侧防止锯骨时离断血管,尽量不要结扎以保持恢复期前肢的血流顺畅。
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