心肌缺血再灌注（I/R）模型

北京永欣康泰科技发展有限公司2022-01-14

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心肌缺血再灌注模型：

心肌缺血是指心脏血液灌注减少，导致心脏供氧减少，心肌能量代谢不正常，不能支持心脏正常工作的一种病理状态。冠心病是临床常见的缺血性心脏病，是指冠状动脉发生粥样硬化引起管腔狭窄或闭塞，导致心肌缺血缺氧或坏死而引起的心脏病，临床以血运重建治疗为主。然而，目前大量研究结果显示，缺血心肌组织恢复血流供应后，心肌受损程度仍可能进一步加重，对心肌造成二次损害，缺血再灌注（I/R）损伤心肌可占全部梗死心肌面积的50%。1960年Jennings等首次提出了I/R损伤概念：当组织细胞低灌流缺血后获得血液在供应时，不但未使组织细胞缺血性损害减轻或恢复后，反而加重了缺血性损伤。探索如何减少心肌I/R损伤具有重要的临床意义。

1、模型种类：

大、小鼠、心肌缺血再灌注

2、实验动物：
C57BL/6J小鼠，雄性，
体重：22g±2g，
周龄：6-8周，
动物等级：SPF级

3、手术方法：
动物深度麻醉，确认麻醉状态后，备皮，安装好心电监护仪，消毒局部皮肤，铺洞巾后剪开肋间皮肤，钝性分离肌肉、打开心包膜，将心脏推出体外，暴露左冠状动脉前降支，用6-0无菌丝线快速结扎，打活结，看到心脏底部变白，用荷包缝法迅速关闭胸腔，挤压防止气胸，造成左室前壁心肌缺血。分别记录术前、缺血时心电图变化。

到达缺血时间以后，解开活结，再次关闭胸腔，缝合肌肉皮肤，进行心肺复苏。分别记录术前、缺血时和再灌注后的心电图变化。造模成功后进行药物治疗，术后观察动物活动、采食情况。处死前对实验动物采血。术后进行心肌组织取样、TTC-Evans blue染色，进行心梗面积计算。

4、实验操作及检测平台：

▲实时心电监护，输出心电图
▲动物心脏超声及数据分析
▲Micro-CT、PET-CT
▲心脏TTC染色
▲心肌内多点注射
▲灌胃、腹腔、尾静脉等多途径给药、大小鼠眼底静脉丛、大动物静脉采血
▲HE、masson，天狼猩红染色
▲免疫组化、免疫荧光、凋亡（Tunel）
▲病理读片，分析梗死面积、胶原百分比
▲透射电镜分析
▲WB、QPCR 心梗相关血清指标检测(CK-MB、cTnI、Myo等）

TTC-Evans blue染色

ECHO

TTC

5、特点：

1、制备过程技术娴熟，最大限度的保证入组动物梗死程度均一。

2、不存在因气管切开而引起的窒息死亡。

3、创伤小，恢复快，最大限度减少人为因素对实验结果的干扰。