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pull-down
DNA Pull Down也称为DNA亲和层析,是一种识别并分析DNA结合蛋白的方法。
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免疫沉淀
免疫沉淀实验是利用抗原-抗体特异性反应富集靶蛋白的一种方法。目前,用于免疫沉淀实验的方法主要有 5 种:抗体结合蛋白免疫共沉淀法、沉降技术法、串联亲和纯化技术法、染色质免疫共沉淀法和 RNA 结合蛋白免疫共沉淀法。
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🔥 Hoechst 染色实验
Hoechst 是一种可以穿透细胞膜的膜通透性荧光染料,在嵌入双链 DNA 后释放蓝色荧光,故正常细胞和中早期凋亡细胞均可被 Hoechst 着色,正常细胞核 Hoechst 染色的形态呈圆形,淡蓝色,内有较深的蓝色颗粒,而凋亡细胞的细胞核由于浓集而呈亮蓝色,或核呈分叶,碎片状。凋亡的细胞核染色增强,荧光更为明亮,呈圆状或固缩状、团块状结构。非凋亡细胞核呈现荧光深浅不一的结构样特征。二者形态迥然相
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🔥 炎症小体的激活及监测
核苷酸结合寡聚化结构域样受体含 pyrin 结构域蛋白 3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor family, pyrin domain-containing 3, NLRP3)炎症小体是近年来研究较多的一类多蛋白复合体,通过调控 caspase-1 活化,诱导炎症因子 IL-1β 和 TNF-α 的成熟和分泌,促进炎症和
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细胞铺板
单细胞铺板是将细胞培养板的每个孔中预先加入适量完全培养基,充分晃动使培养基浸润整个孔底,随后滴加重悬好的细胞悬液,充分摇晃混匀,将细胞分散,不抱团也不过分空荡。
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血管形成实验
在肿瘤发生发展过程中,肿瘤组织常处于缺氧、低营养状态,在这种条件下,由于癌细胞分泌的血管生成因子的激活,会促进大量的新血管生成,为肿瘤生长提供所需的氧气和营养物质。
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小鼠腹腔巨噬细胞培养实验
小鼠腹腔巨噬细胞培可以:(1)吞噬与清除异物;(2)分泌生物活性物质;(3)对仿生全降解材料,降解后的无机产物与生命过程中有机物的合成作用。
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基因型鉴定
用小鼠鼠尾或鼠趾或组织进行小鼠基因型鉴定
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蛋白表达体系构建
大肠杆菌蛋白表达是一种常用的蛋白质表达体系。大肠杆菌是一种常见的细菌,其在生物工程领域中得到了广泛的应用。通过将目的基因插入到大肠杆菌表达载体中,并利用大肠杆菌代谢途径和生理特征,在大肠杆菌中高效表达目的蛋白。
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基因过表达构建实验
过表达载体是将目的基因 CDS 编码区构建到相应的质粒或者病毒载体中,从而在宿主细胞中高效表达大量目的蛋白的质粒载体。过表达载体有多种构建方法,这里介绍一种常见方法——同源重组法。
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血脑屏障通透性检测
伊文思蓝染色是的用途非常广泛,在小动物的活体实验中涉及到心血管系统、神经系统、骨骼肌系统等疾病的研究方法,这里我们主要介绍了伊文思蓝染色在检测血脑屏障通透性中的检测方法及应用。
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荧光免疫层析
荧光免疫层析(Fluorescent Immunoassay,FIA)是一种基于抗体-抗原特异性识别的分析技术,通过荧光信号来检测和定量移动的目标分子。该技术结合了免疫学、荧光学和生物化学等多个学科,具有高灵敏度、高特异性、快速、简便等优点。
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🔥 恒温扩增技术
环介导恒温扩增是指在 60~65 ℃ 等温环境下,DNA 处于动态平衡状态,在此温度下利用 4 种特异引物依靠一种高活性链置换 DNA 聚合酶,使 DNA 在短时间内进行核酸扩增的技术。反应能产生大量的扩增产物即焦磷酸镁白色沉淀,可以通过肉眼观察白色沉淀的有无来判断靶基因是否存在。
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🔥 细胞辐照培养
细胞辐照指的是用 X 射线,B、y 射线等电离射线来辐射细胞的过程。
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🔥 菌液 PCR
不必提取目的基因 DNA,不必酶切鉴定,直接以菌体热解后暴露的 DNA 为模板进行 PCR 扩增与鉴定。
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🔥 蛋白质的真核表达
蛋白表达系统是指由宿主、外源基因、载体和辅助成分组成的体系,载体中含有外源的基因片段,通过载体介导,目的是实现外源基因在宿主中的表达,本文以用于小鼠及兔源 IgG 的通用型二抗 PA/G-HRP 融合蛋白的真核表达为例进行表述。
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🔥 內溶素的表达纯化
作为噬菌体衍生的酶,内溶素本质是一种蛋白分子,其通过分解细菌细胞壁的肽聚糖成分,帮助噬菌体颗粒从细菌宿主释放,可在噬菌体复制过程中表达,破坏细菌细胞壁肽聚糖的关键化学键。
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🔥 内溶素活性检测
作为噬菌体衍生的酶,内溶素本质是一种蛋白分子,其通过分解细菌细胞壁的肽聚糖成分,帮助噬菌体颗粒从细菌宿主释放,可在噬菌体复制过程中表达,破坏细菌细胞壁肽聚糖的关键化学键。
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🔥 细胞铺板技术
细胞铺板技术是细胞的常见又必须的实验操作,在细胞计数、培养、免疫荧光等实验操作中必不可少。根据实验目的将一定浓度的细胞稀释液无污染地接种到细胞计数板中,方便进行下一步操作。
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🔥 类器官培养
是在体外,经过 3D 培养,能够在体外模拟正常(或疾病)状态下体内器官(或组织)的三维结构和生理功能。通俗点讲,类器官是三维细胞培养物,将干细胞培养于基质胶中,在化学小分子抑制剂/激活剂、细胞因子、培养基添加剂等物质作用下经过培养得到的相应器官类似的组织结构。
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