基因过表达构建实验

其他实验

最新修订时间：2023-07-23

简介

过表达载体是将目的基因 CDS 编码区构建到相应的质粒或者病毒载体中，从而在宿主细胞中高效表达大量目的蛋白的质粒载体。过表达载体有多种构建方法，这里介绍一种常见方法——同源重组法。

原理

使用两端带限制性内切酶位点的 PCR 引物扩增目标 DNA 片段，同时用对应限制性内切酶切割质粒载体，再使用同源重组酶连接载体与扩增后的 DNA 片段。

应用

基因功能研究、大量目的蛋白制备。

来源：

操作方法

过表达细胞株的构建指的是通过生物、化学、物理等细胞转染手段将某个特定基因的表达水平保持稳定的提高，从而实现在该细胞系中特定基因或蛋白功能增强。基因过表达作为一种传统的分子生物学技术，被认为是研究基因功能的实验策略之一，至今依然在生物学研究中发挥着重要作用。

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