（小白提问）请问对肿瘤细胞系构建过表达和敲低组时，用来对照的OE-NC和si-NC分别进行了什么处理呢？

你的理解是对的。对于过表达实验，实验组会将目的基因的过表达质粒转染到肿瘤细胞系中，而OE-NC组则是将空质粒转染到肿瘤细胞系中作为对照。因为空质粒不会对目的基因表达产生影响，所以OE-NC组可以作为背景噪音的对照。

对于敲低实验，实验组会使用siRNA转染将目的基因敲低，而对照组则会使用阴性对照siRNA转染，通常选择与目的siRNA序列无关的、不会对目标基因表达产生影响的siRNA作为阴性对照。这样，可以排除siRNA转染过程中的非特异性效应和细胞应答等因素对实验结果的影响，确保实验结果的可靠性。

功能获得实验中，除了构建过表达目的基因的细胞株，还要设置阴性对照，即over expression-negative control。

功能缺失实验中，除了构建siRNA/shRNA抑制目的基因表达，还需设置阴性对照，siRNA-negative control。

两种方法设置对照都是排除其它实验因素引起的干扰。

构建表达和敲低组时，si-NC需要转染

OE-NC是指过表达负对照（Negative Control），即在实验中过表达一种与研究对象无关的基因或空载体，作为对照组。这种处理可以用来排除实验结果中可能由于过表达引起的非特异性效应。

si-NC是指siRNA负对照（Negative Control），即在实验中使用一种与研究对象无关的siRNA序列，作为对照组。这种处理可以用来排除实验结果中可能由于siRNA引起的非特异性效应。

OE-NC和si-NC通常用作对照组，用来比较实验组的效应是否是由于研究对象的过表达或siRNA介导的靶向效应引起的。