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🔥 蛋白质的真核表达

实验分类:

蛋白质实验

最新修订时间:

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合作专家 | 黄婕硕士

生物学 中国科学技术大学

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审核专家 | 聂壹峰博士

纳米生物医学 中国科学院大学

简介

蛋白表达系统是指由宿主、外源基因、载体和辅助成分组成的体系,载体中含有外源的基因片段,通过载体介导,目的是实现外源基因在宿主中的表达,本文以用于小鼠及兔源 IgG 的通用型二抗 PA/G-HRP 融合蛋白的真核表达为例进行表述。

原理

全基因合成金黄色葡萄球菌蛋白 A(SPA)、链球菌蛋白 G(SPG)与辣根过氧化物酶(HRP)融合基因片段,定向克隆至真核表达载体 pcDNATM3.1 骨架中,瞬时转染入人胚肾 HEK293F 细胞进行表达,通过 SDS-PAGE、 Western blot 法鉴定融合蛋白表达情况。

应用

实现多功能蛋白的稳定且高效制备,得到纯度高、均一性好的产物。 

来源:王鹏举,王依依,张仪婷等.用于小鼠及兔源 IgG 的通用型二抗 PA/G-HRP 融合蛋白的真核表达及活性检测[J].细胞与分子免疫学杂志,2021,37(07):590-595.

操作方法

🔥 蛋白质的真核表达——哺乳动物体系

蛋白表达系统是指由宿主、外源基因、载体和辅助成分组成的体系,载体中含有外源的基因片段,通过载体介导,目的是实现外源基因在宿主中的表达,本文以用于小鼠及兔源 IgG 的通用型二抗 PA/G-HRP 融合蛋白的真核表达为例进行表述。

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