疏水作用层析(hydrophobic interaction chromatography, H I C )是蛋白质纯化技术中一个非常有价值的工具。 H I C 用于蛋白质纯化的规模很广泛—分析及制备规模均可。H I C 可用于去除溶液中存在的多种杂质,包括不需要的产品相关杂质。尤其 是 ,H i c 于去除产品巾的聚 合 讽 ,目 其 与 轉 财 特 性 不 H 般 可以有效去除。本章中,我 们
根据交配型的稳定性可以将菌株分为两组,即异宗配合型(heterothallic) 与同宗配合型(homothallic)。异宗配合型菌株的交配型是稳定的,而同宗配合型单倍体菌株的交配型能够发生交配型的改变。所以,一个来自同宗配合型细胞的菌落将同时含有 a 和《细胞以及 a 和 a 细胞交配产生的二倍体细胞。
通过静脉注射特洛伊木马脂质体(Trojan horse liposome, T H L , 也 称 为 P E G y -Iates免疫脂质体, P I L ) 包裹的DNA, 非病毒载体质粒DNA可经血管途径穿过血脑屏障传送人脑。 IOOnm的脂质体表面覆盖着数千个多聚体,如 2000D a 的聚乙二醇(P E G ) , 或 称 P E G 2000。 1 % 〜2 % 的 P E G 分子末
同源重组是基因组操作中最精确的一种方法。作为一个工具,同源重组已经广泛地用于细菌、酵母、鼠胚胎干细胞(E S ) , 以及其他一些特殊细胞系,但在其他系统如哺乳动物体细胞遗传学上还没有得到应用。最近的研究工作表明,在哺乳动物体细胞中,双链 D N A 发生基因特异的断裂,能够引起上千倍的同源重组。目前,利用锌指核酸酶(Z F N ),能够在哺乳动物基因组中形成这种双链断裂。 Z F N 是一种人工
米非司酮诱导的基因调节系统(M I G R S ) 是通过抗孕酮药—米 非 司 酮 (M f p )来调控耙基因表达的体系。该体系利用一种反式激活嵌合蛋白质,此蛋白质重组了部分人孕酮受体的配体结合区(hPR-LBD)、源于酵母Gal4 转录因子的D N A 结合区以及反式激活区。在没有内源性孕酮存在的情况下, M f p 作为一种反式激活子结合于祀基因启动子内上游区域的激活序列,并启动靶基因转录。
大量非病毒体系已经被用于体外培养细胞或体内特定细胞的核酸传递。它们在毒性、免疫原性和靶向特定细胞表面受体或细胞种类的能力等方面具有很大差异。 一 类含有 P-环糊精的线性阳离子聚合物在体内核酸传递中展现出了良好的效果,这些核酸包括质 粒 D N A 、 D N A z y m e 和小干扰R N A 。这类聚合物和核酸形成复合物(p〇 lyP lex),并且可以进一步进行靶向配体(如转铁蛋白)的修