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用特洛伊木马脂质体进行可穿过血脑屏障的非病毒基因转移实验

实验分类:

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简介

通过静脉注射特洛伊木马脂质体(Trojan horse liposome, T H L , 也 称 为 P E G y -Iates免疫脂质体, P I L ) 包裹的DNA, 非病毒载体质粒DNA可经血管途径穿过血脑屏障传送人脑。 IOOnm的脂质体表面覆盖着数千个多聚体,如 2000D a 的聚乙二醇(P E G ) , 或 称 P E G 2000。 1 % 〜2 % 的 P E G 分子末端共价结合了一个靶向性的单克隆抗体 (M A b ) 作为分子特洛伊木马(M T H )。 M T H 与血脑屏障和脑细胞膜上的转铁蛋白和胰岛素等爱体结合,随后在体内触发,受体介导的细胞传递作用使T H L 穿过血脑屏障,与受体介导的穿细胞作用使其进人脑细胞。
作者:T.弗里德曼等,译者:殷勤伟等,本实验来自「基因转移」

来源:丁香实验

操作方法

T H L 的准备

T H L 的准备 材料 试剂 仪 器 超 声 波 清 洗 仪 手 动 挤 压 机(如 Iiposofast 手 动 挤 压 机 , Avestin) 和 聚 碳 酸 酯 滤 器 ,孔 径 为 4 〇〇 nm和 IOOnm 各 两 个(也 可 能 需 要 50nm; 见 步 骤 4) 凝 胶 过 滤 层 析 装 置 玻 璃 管

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