毕赤酵母中的表达实验

一、培养基和微生物操作技术 在 实 验 室 水 平 培 养 毕 赤 酵 母 菌 及 其 他 大 部 分 酵 母 菌 的 技 术 与 培 养 大 肠 杆 菌 和 酿 酒 酵母 菌 类 似 。最 常 用 的 丰 富 培 养 基 是 Y P D [ 1 % 酵 母 提 取 物（yeast extrac0 、2 % 蛋 白 胨(peptone) 、2 % 葡 萄 糖（dextrose)

毕赤酵母表达系统是一种真核表达系统。它是甲醇营养型酵母菌，有两个乙醇氧化酶（a lcoholoxida se, Aox) 码基因 AOXI 和 AOX2，两者序列相似，AOX1 基因严格受甲醇诱导和调控。当甲醇为唯一碳源时，AOX1 启动子可被甲醇诱导，启动乙醇氧化酶的表达，从而用甲醇进行代谢。含 AOXI 启动子的质粒可用来促进编码外源蛋白的目的因的表达。与昆虫表达系统和哺乳动物表达系统相比，酵