亚细胞器及亚细胞结构的分离实验

其他实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

在蛋白质组学的研究中,所有富集技术的一个关键步骤是亚细胞的分级分离，它对于胞内细胞器和多蛋白质复合物的分析是尤其重要的。为了降低样品的复杂性，亚细胞的分级分离应采用一种灵活的和操作性强的方法来进行，且与高分辨率的2D 凝胶/质量光谱法,或独立的凝胶技术联合使用时才能达到最佳效果。
作者：伯吉斯等,主译：陈薇，本实验来自「蛋白质纯化指南」

来源：丁香实验

操作方法

亚细胞器及亚细胞结构的分离实验

一、亚蛋白质组的提取和初步分离 1. 线粒体的富集材料和设备 (1) 蔗糖溶液: 浓度 1 5 % 、2 0 % 、2 5 % 、27. 5 % 、30% 和 3 5 % (m/V)。 (2) 蛋白酶抑制剂混合物。 (3) 磷酸盐缓冲液 (PBS):1. 4 m m 〇 l/L KH2PO4 ，8 m m o l / L Na2 HPO4，140 m