外泌体提取纯化

一、样品预处理1、取样：如果是冻存样品，从冰箱取出后于 25℃水浴中进行解冻，将完全融化后的样品置于冰上；如果是新鲜样品，收集样品后置于冰上；2、样品初始用量：单次提取时的样品量建议细胞培养上清液不低于 20 mL；3、离心去细胞颗粒：将样品转移至离心管中，于 4℃以3,000×g（~5,200rpm）离心 10 min，去除样品中的细胞碎片；（注：若沉淀较多，可3000 g，10 min离心多次

一、样品预处理1、取样：如果是冻存样品，从冰箱取出后 于 25℃水浴中进行解冻，将完全融化后的样品置于冰上；如果是新鲜样品，收集样品后置于冰上；2、样品初始用量：单次提取时的尿液量建议不低于20 mL3、离心去细胞碎片：将样品转移至离心管中，于4℃ 以3,000 ×g（~5,200rpm）离心10 min，去除样品中的细胞碎片（注：若沉淀较多，可3,000 ×g，10 min 离心多次至无明显沉淀

一、样品预处理1、取样：如果是冻存样品，从冰箱取出后于 25℃水浴中进行解冻，将完全融化后的样品置于冰上；如果是新鲜样品，收集样品后置于冰上；2、样品初始用量：单次提取时的样品量建议血清、血浆不低于200 μL；3、离心去细胞碎片：将样品转移至离心管中， 于 4℃以3,000 ×g（~6,200 rpundefined）离心10 min，去除样品中的细胞碎片（注：若沉淀较多，可3,000 ×g，10 min 离

一、样品预处理1、取样：如果是冻存样品，从冰箱取出后于 25℃水浴中进行解冻，将完全融化后的样品置于冰上；如果是新鲜样品，收集样品后置于冰上；2、样品初始用量：单次提取时的样品量建议肺泡灌洗液、腹水等不低于1 mL，建议1 次提取2-3 mL 体积；3、离心去细胞碎片：将样品转移至离心管中，于4℃ 以3,000 ×g（~6,200 rpm）离心10 min，去除样品中的细胞碎片（注：若沉淀较多，可

一、样品预处理1、取样：如果是冻存样品，从冰箱取出后于 25℃ 水浴中进行解冻，将完全融化后的样品置于冰上；如果是新鲜样品，收集样品后置于冰上；2、样品初始用量：单次提取时的乳液量建议不低于25 mL；3、离心去脂：将样品转移至离心管中，于4℃ 以10,000 ×g（~9,500rpm）离心20 min，去除样品中的脂质及部分蛋白（注：离心后样品分为三层，上层为脂质层，下层为蛋白沉淀，中间层为乳清

一、样品预处理1、离心机在使用前先于 4℃预冷 10 min；2、取样：如果是冻存样品，从冰箱取出后于25℃ 水浴中进行解冻，将完全融化后的样品置于冰上，如果是新鲜样品，收集样品后置于冰上；3、将样品按照500 μL 每管进行分装，不足部分用1×PBS 补足至500 μL；4、离心去细胞碎片：将样品转移至1.5 mL 离心管中，于4℃ 以3,000×g（~6,200 rpm）离心10 min，去除

一、样品预处理（1）粪便样本收集在无菌的宽口容器中，立即使用（收集样品后置于冰上）或冷藏(4°C)。（2）使用勺子将 3g 的粪便转移到预先称重的离心管中，向试管中加入预冷(2℃ ~ 8℃)的 30 毫升无内毒素 PBS（按照每1g 粪便对应 10 毫升 PBS 加入）。（3）通过涡旋振荡器充分混匀粪便样本 5 分钟。在此步骤中，将高速离心机和离心转子冷却至 4°C。（4）将混匀粪便的离心管放入高

一、样品预处理1、提前将 Solution A2 置于 4℃或冰上融化并混匀；2、组织剪碎：在消毒器皿（置于冰上）中将组织剪切成 1 mm3～3 mm3左右的碎组织块（剪切得越小越好）；3、组织碎片清洗：将组织碎块转移至离心管中，加入不少于10 倍体积的 1 × PBS 缓冲液，振荡混匀后 300 ×g（~2000 rpm）离心10 min， 弃上清；_为约7cm有效离心半径的离心机换算（≤2