卵磷脂的提取纯化、鉴定的原理及方法

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卵磷脂具有极大的医药保健作用，很多研究者都在寻找高纯度卵磷脂的梯度洗脱层析的溶剂萃取工艺。本文主要总结了卵磷脂的提取纯化、鉴定的原理以及方法步骤。

一、目的：

1.加深了解磷脂类物质的结构和性质.

2.掌握卵磷脂的提取鉴定的原理和方法.

二、实验原理：

磷脂是生物体组织细胞的重要成分,主要存在于大豆等植物 组织以及动物的肝、脑、脾、心等组织中,尤其在蛋黄中含量较多(10%左右).卵磷脂和脑磷脂均溶于乙醚 而不溶于丙酮,利用此性质可将其与中性脂肪分离开;此外,卵磷脂能溶于乙醇而脑磷脂不溶,利用此性质又可将卵磷脂和脑磷脂分离.

新提取的卵磷脂为 白色,当与空气接触后,其所含不饱和脂肪酸会被氧化而使卵磷脂呈黄褐色.卵磷脂被碱水解后可分解为脂肪酸盐、甘油、胆碱和磷酸盐.甘油与硫酸氢钾共热,可 生成具有特殊臭味的丙烯醛;磷酸盐在酸性条件下与钼酸铵作用,生成黄色的磷钼酸沉淀;胆碱在碱的进一步作用下生成无色且具有氨和鱼腥气味的三甲胺.这样通 过对分解产物的检验可以对卵磷脂进行鉴定.

三、仪器和试剂：

仪器：

小烧杯、试管.

试剂：

1. 鸡蛋黄

2. 红色石蕊试纸

3. 95%乙醇

4. 10%氢氧化钠溶液

5. 钼酸铵试剂将6g 钼酸铵溶于15mL 蒸馏水中,加入5mL 浓氨水,另外将24mL 浓硝酸溶于46mL的蒸馏水中,两者混合静置一天后再用.

6. 丙酮

7. 乙醚

8. 3%溴的四氯化碳溶液

9. 硫酸氢钾

四、操作步骤：

(一)卵磷脂的提取：

称取约10g 蛋黄于小烧杯中,加入温热的95%乙醇30mL,边加边搅拌均匀,冷却后过滤.如滤液仍然混浊,可重新过滤直至完全透明.将滤液置于蒸发皿内,水浴锅中蒸干,所得干物即为卵磷脂.

(二)卵磷脂的溶解性：

取干燥试管,加入少许卵磷脂,再加入5mL 乙醚,用玻棒搅动使卵磷脂溶解,逐滴加入丙酮3～5mL,观察实验现象.

(三)卵磷脂的鉴定：

1、三甲胺的检验：

取干燥试管一支,加入少量提取的卵磷脂以及2～5mL 氢氧化钠溶液,放入水浴中加热15min,

在管口放一片红色石蕊试纸,观察颜色有无变化,并嗅其气味.将加热过的溶液过滤,滤液供下面检验.

2、不饱和性检验：

取干净试管一支,加入10滴上述滤液,再加入1～2滴3% 溴的四氯化碳溶液,振摇试管,观察有何现象产生.

3、磷酸的检验：

取干净试管一支,加入10滴上述滤液和5～10滴95%乙醇溶液,然后再加入5~10滴钼酸铵试剂,观察现象;最后将试管放入热水浴中加热5～10min,观察有何变化.

4、甘油的检验：

取干净试管一支,加入少许卵磷脂和0.2g 硫酸氢钾,用试管夹夹住并先在小火上略微加热,使卵磷脂和硫酸氢钾混熔,然后再集中加热,待有水蒸气放出时,嗅有何气味产生.

卵磷脂是一种重要的生理物质，又是一种天然的表面活性剂，具有极大的医学价值。然而目前提取高纯度卵磷脂技术还是一篇空白，因此开发卵磷脂提取纯化工艺迫在眉睫。