卵磷脂的提取及鉴定

一、实验目的

1.加深了解磷脂类物质的结构和性质。

2.掌握卵磷脂的提取鉴定的原理和方法。

二、实验原理

磷脂是生物体组织细胞的重要成分，主要存在于大豆等植物组织以及动物的肝、脑、脾、心等组织中，尤其在蛋黄中含量较多(10%左右)。卵磷脂和脑磷脂均溶于乙醚而不溶于丙酮，利用此性质可将其与中性脂肪分离开；此外，卵磷脂能溶于乙醇而脑磷脂不溶，利用此性质又可将卵磷脂和脑磷脂分离。

新提取的卵磷脂为白色，当与空气接触后，其所含不饱和脂肪酸会被氧化而使卵磷脂呈黄褐色。卵磷脂被碱水解后可分解为脂肪酸盐、甘油、胆碱和磷酸盐。

甘油与硫酸氢钾共热，可生成具有特殊臭味的丙烯醛；磷酸盐在酸性条件下与钼酸铵作用，生成黄色的磷钼酸沉淀；胆碱在碱的进一步作用下生成无色且具有氨和鱼腥气味的三甲胺。这样通过对分解产物的检验可以对卵磷脂进行鉴定。

三、 仪器和试剂

仪器

小烧杯、试管。

试剂

1. 鸡蛋黄

2. 红色石蕊试纸

3. 95%乙醇

4. 10%氢氧化钠溶液

5. 钼酸铵 试剂 将6g 钼酸铵溶于15mL 蒸馏水中，加入5mL 浓氨水，另外将24mL 浓硝酸溶于46mL的蒸馏水中，两者混合静置一天后再用。

6. 丙酮

7. 乙醚

9. 硫酸氢钾

四、操作步骤

(一)卵磷脂的提取

称取约10g 蛋黄于小烧杯中，加入温热的95%乙醇30mL，边加边搅拌均匀，冷却后过滤。如滤液仍然混浊，可重新过滤直至完全透明。将滤液置于蒸发皿内，水浴锅中蒸干，所得干物即为卵磷脂。

(二)卵磷脂的溶解性

取干燥 试管 ，加入少许卵磷脂，再加入5mL 乙醚，用玻棒搅动使卵磷脂溶解，逐滴加入丙酮3～5mL，观察实验现象。

(三)卵磷脂的鉴定

1.三甲胺的检验

取干燥 试管 一支，加入少量提取的卵磷脂以及2～5mL 氢氧化钠溶液，放入 水浴 中加热15min，

在管口放一片红色石蕊试纸，观察颜色有无变化，并嗅其气味。将加热过的溶液过滤，滤液供下面检验。

2.不饱和性检验

取干净试管一支，加入10滴上述滤液，再加入1～2滴3% 溴的四氯化碳溶液，振摇试管，观察有何现象产生。

3.磷酸的检验

取干净试管一支，加入10滴上述滤液和5～10滴95%乙醇溶液，然后再加入5~10滴钼酸铵试剂，观察现象；最后将试管放入热 水浴 中加热5～10min，观察有何变化。

4.甘油的检验

取干净 试管 一支，加入少许卵磷脂和0.2g 硫酸氢钾，用 试管 夹夹住并先在小火上略微加热，使卵磷脂和硫酸氢钾混熔，然后再集中加热，待有水蒸气放出时，嗅有何气味产生。