丁香实验-30万科研人都在用的实验宝库

搜索到 697 条结果

综合

实验

方法

问答

文章

DNA 测序

DNA测序可用于：（1）测定未知序列；（2）确定重组DNA的方向与结构；（3）对突变进行定位和鉴定比较研究。

实验概况收录 5 操作方法 · 1 相关问答 · 3 相关文章

筛选聚合物转染试剂的高通量方法

发展安全有效的基因传输系统是确保临床基因治疗成功的先决条件。尽管病毒载体的转基因效率高，但出于安全性及病毒免疫原性的考虑，研究人员开始寻找替代病毒的非病毒载体材料（Nishikawa and H u a n g 2001; Check 2003)。聚阳离子作为其中一类非病毒载体极真潜力（D e Smedt

实验概况收录 1 操作方法 · 2 相关问答 · 3 相关文章

二代测序确定 sgRNA 文库的 sgRNA 分布

插入缺失率可以用 SURVEYOR 核峻酶测定法或新一代测序技术测定，新一代测序技术更适合对大量 sgRNA 作用杷标位置进行采样。

操作方法所属实验：全基因组CRISPR-Cas9基因敲除和转录激活筛选实验

纳升高通量 PCR

纳升高通量 PCR 是指将高通量的芯片技术与 PCR 技术结合在一起产生的一种新的方法，商用的 TaqMan® OpenArray™系统已将反应体系降至纳升，这对稀少样品的检测极为有利，并且在一张芯片上可以完成多达 3072 个反应，可以进行终点定量，也可以进行实时定量。

操作方法所属实验：PCR 芯片

问高通量测序甲基化修饰的问题

你好几和户

m6A RNA甲基化建库测序的原理是通过抗体特异性结合m6a修饰位点，再通过免疫共沉淀反应将m6a RNA甲基化片段富集，再进行建库测序即可完成在全转录组范围的m6a位点检测。宏基因组不包含对某个特定微生物种群的靶向，即不会对微生物特定种群进行单一性测序（真菌、细菌或者病毒），而是所有微生物基因组的总和。

实验问答2 回答451 围观

问q-pcr验证高通量测序结果，结果为啥反复横跳？

汤姆卜丽波

这样的结果是不行的，三次独立重复的话。每次都要提RNA之后测浓度，必要时还要跑胶防止降解

实验问答6 回答456 围观

高通量测序介绍

高通量测序技术是对传统测序一次革命性的改变，一次对几十万到几百万条DNA分子进行序列测定，使得对一个物种的转录组和基因组进行细致全貌的分析成为可能，所以又被称为深度测序(deep sequencing)。自从2005年454 Life Sciences公司（2007年该公司被Roche正式收购）推出了454 FLX焦磷酸测序平台（454 FLX pyrosequencing platform）以来，曾推出过3730xl DNA测序仪（3730xl

文章资讯18732 阅读

实验讲堂开课：高通量测序是神马鬼？

生物学霸要开实验讲堂啦，每周给大家讲解一种实验技术，还会邀请技术大牛来答疑哦，看大家的喜欢程度啦。今天的主题是——高通量测序。小师妹：霸霸，什么是高通量测序呀？霸霸：高通量测序也叫下一代测序哦，你是不是想问那上一代测序是啥呢？嘿嘿，还真有，传统的叫桑格测序-Sanger Sequencing。小师妹：这个我知道，以前基因都要送去测序的。那高通量测序是神马鬼呢？霸霸：哈哈，小师妹就是聪明。高通量测序就是一次运行能产生很多的基因

文章资讯1851 阅读

化学测序法实验

化学测序的重要性始终表现在：得到寡核苷酸的序列，转录调控信号功能分析（甲基化干涉分析，Carey and Smale 2000), 以及这些信号在活细胞中的鉴定（基因组印记，Church and Gilbert 1984)。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。

实验概况收录 1 操作方法 · 3 相关文章

测序反应实验

要得到合适的信号强度，可根据 DNA 片段的大小调节 DNA 的用量。适用于 ABI PRISM Big Dye Terminator Ready Reaction mix(Applied Biosystems) 和 GeneAmp PCR System9700(Applied Biosystems) 热循环仪。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。

实验概况收录 1 操作方法 · 3 相关文章

测序酶进行标记测序反应

1. 对于每个单链模板：将下列试剂混合于0.5 ml 微量离心管中（1）0.5 pmol 单链DNA模板（2）0.5 pmol 引物（3）1 μl 10×测序酶缓冲液（4）加水至10 μl（5）用吸管上下抽吸轻轻混匀（避免产生气泡）。于65℃温育6 min，然后于37 ℃温育20 min，转到步骤3。 2. 对于每个双链DNA模板：以下列混合液重溶含0.5 pmol 变性双链模板的干燥沉淀物。（1）1 pmol 引物（2）1 μl 10×测序酶缓冲液（3）加水至10 μl（4）用吸管

操作方法所属实验：双脱氧法 DNA 测序实验

使用 TAQMAN 分析法的高通量基因分型实验

1.96孔透明板B到H行每孔加2ul (30ng）基因组DNA，保留A行作对照—其中4孔只加2ul缓冲液作为「无 DNA」对照，余下8孔每孔加24基因组DNA作为阳性对照，两种纯合子各加4孔。2.每孔加23ul PCR混合液，盖上透明盖，在水平离心机上短暂离心，用ABI PRISM 7700测序仪得到一个PCR反应前荧光读数。使用「PlateRead」形式，确保选中Use Spectral Compensation forEndpoint 项（在Advanced Optionsinthe

操作方法所属实验：使用 TAQMAN 分析法的高通量基因分型实验

问基因芯片检测是如何实现高通量的？

xuchanglu88

这个是通过一个芯片设计很多个基因的探针实现的。而现在提到高通量，一般是通过二代测序技术实验的，基因芯片技术也逐渐被二代测序替代。

实验问答3 回答686 围观

问蛋白测序与mRNA测序具体应用方面有啥差别？

汤姆卜丽波

这个要根据你的实验目的，比如在研究DNA甲基化或者转录水平的调控时，只检测mRNA表达就可以了，但要研究某个基因功能的时候，通常要用到的过表达敲低技术时，检测其蛋白的表达将会比检测mRNA更有说服力，因为只有该基因表达成蛋白了，才能行使其生物学功能，从而对下游基因或细胞产生影响。对于检测临床标本或者动物组织中的基因表达，如果同时检测mRNA和蛋白并得到一致的结果将会更有说服力。

实验问答2 回答938 围观

Roche 454（GS FLX Titanium System）超高通量测序技术原理

2005年底，454公司推出了革命性的基于焦磷酸测序法的超高通量基因组测序系统——Genome Sequencer 20 System，被《Nature》杂志以里程碑事件报道，开创了边合成边测序的先河。2007年又推出了性能更优的第二代基因组测序系统——Genome Sequencer FLX System。2008年10月，454推出了全新的GS FLX Titanium系列试剂和软件，让GS FLX的通量一下子提高了5倍，准确性和读长

文章资讯12052 阅读

基因组高通量测序

基因组高通量测序在最近几年中，高通量测序技术已经由以凝胶板为基础的方法(例如“S放射标记测序手册、ABl 373、ABIPRISM 377、Li-corIR2型DNA测序仪)发展到毛细管测序仪(如ABI Prism 3100、3700和3730xl型DNA测序仪，Megabace1000和Megabace 5000)测序，已有关于制备DNA和测序的方法及设备的评论发表(Meldrum，2000a，b)。利用毛细管测序仪的转变解决了凝胶板技术内在的通路追踪问题，毛细管测序仪的自动化显著

文章资讯4599 阅读

蛋白质测序

蛋白质测序可用于：（1）鉴定蛋白质；（2）表征蛋白质翻译后修饰。（3）分析蛋白质一级结构与功能的关系。

实验概况收录 1 操作方法 · 2 相关问答 · 3 相关文章

使用 TAQMAN 分析法的高通量基因分型实验

本单元讲述了 5'-核酸酶等位基因特异性分析或 TaqMan 法在单核苷酸多态（SNP) 分型的应用。

实验概况收录 1 操作方法 · 3 相关文章

化学测序法实验

/L;Fisher) 混合 9 倍体积水。1mol/L 哌啶甲酸用 10mol/L 哌啶将 4% 甲酸水溶液调至 pH2.0 即可，3mol/L 乙酸钠（pH5.2)胶聚丙烯酰胺测序凝胶Maxam-Gilben 测序反应产物通常在 6% 或者 8% 的变性聚丙烯酰胺凝胶上分析（请参考方案 8)。梭酸和寡梭苷酸鲑鱼精 DNA(lmg/ml) 水溶液修剪的鲑鱼精 DNA 通常被用来作为化学测序的载体。事实上，几乎所有 DNA 都可以。而修剪的鲑鱼精 DNA 可以作为商品买到，同时也可以在实验室中得到

操作方法所属实验：化学测序法实验

测序反应实验

一、材料1. 缓冲液和溶液ABI PRISM Big Dye Terminator Ready Reaction mix(Applied Biosystems) 或其他循环测序试剂盒2. 核酸和寡核苷酸引物和模板3. 特殊设备DNA 扩增用薄壁 PCR 管热循环仪，GeneAmp PCR System9700(Applied Biosystems) 仪或相当产品二、方法1. 将适量（如上所述）的引物和模板加入到 PCR 管中。2. 每管加入 4ul Terminator Ready

操作方法所属实验：测序反应实验