病毒感染细胞实验可以用于：（1）将目的基因整合到大多数真核细胞。（2）将目的基因包装成病毒来感染细胞，从而得到表达满足实验需求。

A 组轮状病毒是引起婴幼儿腹泻的主要病原物， 迄今尚无特效药， 仅有两种重配减毒活疫苗上市， 但尚存在保护谱有限， 病毒毒力恢复等安全隐患。研究轮状病毒的发病机制以研制有效的疫苗和靶向药物就显得尤为重要。从 20 世纪 80 年代起， 人们开始探索与人源轮状病毒临床感染表现， 组织病理改变等方面与人感染接近的动物实验模型。在研究初期， 都是用大型哺乳动物如新生牛羊、猪等， 但是存在着种属限制性、动物遗传背景复杂。 繁殖能力弱、无菌性不能保证、实验费用高和特异性动物抗体很难从商业渠道获得等缺点

OST7-1 细胞来源于鼠 L929 细胞，能在细胞质中持续表达噬菌体 T7 RNA 聚合酶，因此，应用此细胞系无需用 vTF7-3 感染细胞。

物。（5） 6-10h后，移除含有DNA-脂质体复合物的培养基，代之以正常培养液DMED+10%FB（从此刻开始算时间）。第三天：转染24h后，荧光显微镜下观察，转染效率应达到70%以上第四天：（1）转染后48和72h分别收获含病毒的上清。（2）3000 rpm 离心20min，0.45um滤膜过滤，去除细胞沉淀。（3）12000转离心浓缩细胞、分装-80°C贮存。（4）滴度测定目的基因检定，并出具检测报告。五、慢病毒感染细胞1、流程图2、感染步骤（1）铺板：将对数生长期的细胞消化重悬后，按1*105/L

人乳头瘤病毒 （human papillomavirus，HPV） 是一种 DNA 病毒， 可以引起人宫颈癌， 肛门生殖器癌、尖锐湿疣等多种良性、恶性肿瘤， 严重威胁人类健康。迄今已发现 HPV 基因型超过 100 多种， 其中至少有 30 种与人类泌尿生殖道肿瘤有关。HPV6、HPV11 主要引起生殖器疣，HPV16，HPV18 和 HPV31 主要引起宫颈癌和上皮细胞肉瘤。

实验动物接种途径可根据病毒感染特性和检测目的来确定，并根据病毒选择实验动物种类和病毒接种量。来源：《病毒学检验》

目的细胞腺相关病毒感染贴壁细胞：（1）细胞铺板：感染前一天用 293 T 细胞接种一块 96 孔板，培养24 h后细胞密度达到 30%~40% 进行感染。（2）病毒感染：取出接种 24 h 后的 293 T 细胞板，标记后，取待感染病毒样品，感染相应的孔，每孔加入 5 μL 样品（正常的 AAV 病毒滴度在 1 E + 12~1 E + 13 v.g/mL）后，放入培养箱，继续培养 48 h。（3）感染情况确认：感染后 48 h 取出孔板在荧光显微镜下观察并判定病毒感染效率。悬浮

）贴壁细胞的感染(1) 保证细胞的良好生长状态，实验前一天制备密度为 3~5×104 个/ml 细胞悬液，接种 100 μL 细胞悬液于 96 孔板中。预感染时共需 13 个孔，一般不使用边缘孔。不同种类的细胞生长速度有所差异，为保证较好的实验结果，进行慢病毒感染时细胞的融合率应为 20%-40%。(2) 感染预实验共设置三组感染条件，每组均设置四个不同梯度 MOI。用目的细胞培养基 Normal（不含血清）将慢病毒梯度稀释成 1×108 TU/mL、5×107 TU/mL 、1×107TU/mL

荧光原位杂交可应用于：（1）动植物基因组结构研究；（2）染色体精细结构变异分析；（3）病毒感染分析；（4）肿瘤遗传学和基因组进化研究。

自然杀伤细胞（natural killer cell，NK）是机体重要的免疫细胞，不仅与抗肿瘤、 抗病毒感染和免疫调节有关，而且在某些情况下参与超敏反应和自身免疫性疾病的发生。

目的细胞腺病毒感染（1） 贴壁细胞：处于对数生长期的细胞胰酶消化，完全培养基制成 5~10×104 个/mL 细胞悬液，并根据表 1 接种相应的细胞数到培养板中，继续培养保证感染时铺板量达到 60% 左右。表 1. 贴壁细胞接种和病毒感染时感染液体积按照预实验结果，参考表 1 更换感染培养基，加入最适病毒量进行感染。参照预实验结果，选择感染后最适时间点更换为常规培养基继续培养，一般为感染后 8~12 h。（2） 悬浮细胞：按照预实验确定的感染条件，使用感染液将细胞制成 5~10×104 个/mL