病毒感染细胞实验
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简介
病毒感染细胞实验可以用于：（1）将目的基因整合到大多数真核细胞。（2）将目的基因包装成病毒来感染细胞，从而得到表达满足实验需求。
来源：丁香实验
操作方法
质粒 DNA 和其他包装质粒共转染 293T 细胞产生病毒（即病毒包装）共转染的操作步骤：第一天：用无抗生素 DMEM + 10% FBS 铺板 293T 细胞，2 ml/孔，确保第二天细胞密度达到 80%~90% 融合度。第二天：（1）500 μl 无血清培养基稀释 2 μg 表达质粒 + 1.5 μg psPAX2 + 1.5 μg pMD2.G。（2）500 μl 无血清培养基稀释 15 μ
慢病毒感染细胞1．准备目的细胞（1） 从液氮罐中取出细胞冻存管，迅速放入 37℃ 水浴中，并不时摇动使其尽快解冻。（2） 完全解冻后，1300 rpm，离心 3 min，75% 酒精擦拭冻存管消毒后，移至生物安全柜。（3） 吸去冻存液上清，加入 1 mL 新鲜的完全培养基重悬细胞，将细胞悬液接种至含有 3 mL 完全培养基的 6cm 培养皿中，轻轻晃匀后置于37℃、5% CO2培养箱。（4） 24 h 后更换一
腺病毒感染细胞1．准备目的细胞（1） 从液氮罐中取出细胞冻存管，迅速放入 37℃ 水浴中，并不时摇动使其尽快解冻。（2） 完全解冻后，1300 rpm，离心 3 min，75% 酒精擦拭冻存管消毒后，移至生物安全柜。（3） 吸去冻存液上清，加入 1 mL 新鲜的完全培养基重悬细胞，将细胞悬液接种至含有 3 mL 含完全培养基的 6cm 培养皿中，轻轻晃匀后置于37℃、5% CO2培养箱。（4） 24 h 后更换
腺相关病毒感染细胞1．准备目的细胞（1） 从液氮罐中取出细胞冻存管，迅速放入 37℃ 水浴中，并不时摇动使其尽快解冻。（2） 完全解冻后，1300 rpm，离心 3 min，75% 酒精擦拭冻存管消毒后，移至生物安全柜。（3） 吸去冻存液上清，加入 1 mL 新鲜的完全培养基重悬细胞，将细胞悬液接种至含有 3 mL 含完全培养基的 6cm 培养皿中，轻轻晃匀后置于37℃、5% CO2培养箱。（4） 24 h 后更换
病毒感染细胞 MOI 值摸索为了确认合适的感染条件，按照不同培养条件将实验分为 4 组：A 组：常规培养基组，观察常规培养条件下病毒对细胞的感染效果；B 组：添加 HitransG A（简称 A 液）的常规培养基组，观察 HitransG A 是否可以提升感染效果；C 组：添加 HitransG P（简称 P 液）的常规培养基组，观察 HitransG P 是否可以提升感染效果；Control 组：监控实验过程中细胞生长是否
细胞实验最佳抗生素浓度确认在哺乳动物细胞中产生稳定的细胞系时，如果表达系统携带耐药基因，则通过在培养基中添加抗生素药物来选择稳定转染/转导的细胞是一种有效的方法。由于哺乳动物细胞对抗生素的敏感性因细胞类型而异，因此必须通过单独的杀伤曲线实验来确定杀死非转染或非转导细胞所需的抗生素的最低浓度
