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细胞实验原创经验

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在细胞实验室,有很多经验很难总结在书本上,但是与整个实验的成功却密切相关,现在建立新贴,想到哪里说道哪,随时补充并建议高手随时添加内容,大家共享自己实验中积累的小窍门。

1)细胞冻存管一般有1.5-2ml左右体积,原则上可以存放1.5ml充满均匀悬浮细胞的冻存液,一些人喜欢灌注1-1.5ml冻存液冻存,这实际上并不好。原因如下:冻存液冻存需要一段时间,如果这段时间冻存管倾斜,液体容易流到管口,很容易在后续的操作中造成污染。建议0.5-1ml之间即可。

2)许多教科书推荐细胞解冻用37度水,本人发现温度可以适当提高,39度也没有问题,虽然只提高了2度,却可以加速细胞解冻的时间。解冻后有提点挺重要,迅速用75%乙醇消毒冻存管管口和双手,然后进入下一步工作,随时别忘无菌操作。

3)当无菌操作台经常有多人工作时,记住自己用时,尽量把各种实验用物在紫外灯下消毒30-40分钟, 包括枪头,移液器,废液缸等容易忽略的物品。但是,不要让胰酶和培养液处在紫外灯照时下!

4)准备用实验台时,关掉紫外灯的同时,应打开鼓风机,如果操作太两边都有风机旋钮,应该保持两边风机风速一致,而且应该大于100,以免飞虫进入(当然不能吹灭酒精灯火苗)。最好再用75酒精蘸洁净一次性纸巾擦试所有可以消毒的地方,尤其是工作面。

5)如果不是通过两个圆孔进入手臂操作,而需要抬高操作台前置玻璃挡板,一般不要超过15厘米,主要目的还是减少污染几率。

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