荧光原位杂交实验

1. 探针变性 将探针在75℃恒温水浴中温育5 min，立即置0℃，5～10 min，使双链DNA探针变性。 2. 标本变性 （1）将制备好的染色体玻片标本于50℃培养箱中烤片2～3 h。（经Giemsa染色的标本需预先在固定液中退色后再烤片）。 （2）取出玻片标本，将其浸在70～75℃的体积分数70% 甲酰胺/2x SSC的变性液中变性2～3 min。 （3）立即按顺序将标本经体积分数

1a. 石蜡切片或细胞的杂交：按石蜡切片或细胞的原位杂交实验的基本方案步骤1~7，对载玻片进行脱蜡、水化、 封闭和脱水处理。将标本晾干（或在干燥器中干燥），随后贮于加有干燥剂的载玻片盒中，置-70℃过夜。 1b. 冰冻切片的杂交：按冰冻切片的原位杂交实验的备择方案步骤1~7，进行切片的预处理和乙酰化处理， 随后进行切片的脱水。 2. 对每一杂交实验，可用乙醇沉淀10~15 ng 探针，重溶于