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非标记抗体免疫酶组织化学实验
）、OAGO（GO）复合物。该复合物由于没有一个抗体受到共价键的标记，保留了免疫活性，相对分子质量较小，对细胞的穿透性好。该技术主要有酶桥法和过氧化物酶抗过氧化物酶（PAP）复合物法，以及一些变型的方法。特别是 PAP 法大大提高了检测的敏感性，且染色背景轻，稳定性好，得到了广泛应用。内容来源于《免疫组织化学实验技术及应用》
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组织切片的免疫过氧化物酶标记实验
这是一种非常敏感的方法。用以构成HRPO-抗过化物酶（PAP）复合物的抗体，其类型必须与被桥连抗体所识别的第一抗体相同。
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酶桥法
孵育 60 min 或 4℃ 过夜，PBS 洗 3 × 3 min。6. 第二抗体（也称桥抗体，抗种属 A 的 IgG 抗体）37℃ 孵育 40 min，PBS 洗 3 × 3 min。7. 抗酶抗体（来自种属 A）37℃ 孵育 40 min，PBS 洗 3 × 3 min。8. 酶（HRP 70～100 μg/ml，PBS 溶解）37℃ 孵育 40 min，PBS 洗 3 × 3 min。9. 0.04% DAB + 0.03% H2O2 显色 8～12 min，最好在光镜下控制。10. 充分
操作方法所属实验：非标记抗体免疫酶组织化学实验
染色实验
染色实验与染色浓度，细胞的多少，室温有关，染液淡，温度低，细胞多则染色时间较长，反之，可减少时间，必要时可增加染液量或增加时间。冲洗前，需要在低倍显微镜下观察染色是否核质分明，是否染色清楚。
操作方法所属实验：吉姆萨染色实验
核质 karyoplasm nucleoplasm
即核的原生质。是细胞质的对应词。是核膜内所包含的原生质之总称。一如细胞质有颗粒、膜状结构和透明质那样，而核质是由染色体（染色质）、核仁、小颗粒等和核液组成的。在“核基质”的意义上，与含有小颗粒的核液大致可作同义词使用。
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大鼠骨桥素(OPN)酶联免疫分析（ELISA）
大鼠 骨桥素(OPN ) 酶联免疫分析（ELISA ） 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定大鼠血清，血浆及相关液体样本 中 骨桥素(OPN ) 的 含量。 实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中 大鼠 骨桥素(OPN ) 水 平。用纯化的 大鼠 骨桥素(OPN ) 抗体 包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入 骨桥素(OPN ) ，再与 HRP 标记
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SPA 在免疫组化中的应用
SPA 可为多种示踪物（如荧光素、酶、胶体金、铁蛋白）所标记，应用较广泛的为酶标记 SPA 和金标记 SPA 技术。标记 SPA 常用的酶为 HRP，可应用于间接法染色，SPA 在 PAP 法中可代替桥抗体。内容来源《免疫组织化学实验技术及应用》
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细胞凝集反应与细胞膜的渗透性
细胞膜是由脂类双分子层镶嵌蛋白质构成的单位膜，而脂类和蛋白质又与糖分子结合为细胞表面的分枝状糖外被。凝集素是一类可逆结合特异糖基的蛋白质，具有使细胞凝集、血型鉴定、促进淋巴细胞分裂、防害抗虫等作用。凝集素使细胞凝集是由于它与细胞外被的寡糖链相连接，起到“桥”的作用。
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双 PAP 法
1. 4 μm 石蜡切片 58℃ 烤片 4 h，切片常规脱蜡至水。2. 蛋白酶消化或 AR（组织抗原的暴露或抗原的修复，此步视情况而定）。3. 0.3％ H2O2 处理切片 20 min（室温），PBS 洗 3 min × 2 次。4. 3％ 正常动物血清处理切片 30 min（室温），吸去多余血清，不洗。5. 适当稀释的特异性一抗孵育（4℃ 过夜或 37℃60 min），PBS 洗 3 min × 3 次。6. 滴加桥抗体（二抗），37℃ 孵育 40 min，PBS 洗 3 min ×
操作方法所属实验：非标记抗体免疫酶组织化学实验
PAP 法
1. 4 μm 石蜡切片 58℃ 烤片 4 h，切片常规脱蜡至水。2. 蛋白酶消化或 AR（组织抗原的暴露或抗原的修复，此步视情况而定）。3. 0.3％ H2O2 处理切片 20 min（室温），PBS 洗 3 min × 2 次。4. 3％ 正常动物血清处理切片 30 min（室温），吸去多余血清，不洗。5. 适当稀释的特异性一抗孵育（4℃ 过夜或 37℃60 min），PBS 洗 3 min × 3 次。6. 滴加桥抗体（二抗），37℃ 孵育 40 min，PBS 洗 3 min ×
操作方法所属实验：非标记抗体免疫酶组织化学实验
核质蛋白(nucleoplasmin)
从真核细胞核中分离出的一种蛋白质, 最早是Laskey等人于1978年在非洲爪蟾卵的浸出液中发现的。核质蛋白在细胞质中合成后就通过核定位信号运送到细胞核, 是一种丰富的核蛋白, 在核小体的装配中起作用。核质蛋白的作用在于既能促进组蛋白与DNA的相互作用形成核小体, 又能避免DNA与组蛋白间因强静电吸引而形成非特异结合的不溶性聚合物, 但它本身并不参与核小体的组成。 核质蛋白具有头尾两个不同的结构域, 由5个 单体组成, 分子量为165kDa, 是耐热性可溶蛋白。尾部
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核质比 karyoplasmic ratio
指一个细胞的核与细胞质在量（容积）上的比例。通常一个细胞的核成为多倍体时，其细胞质的量也按相应的倍数增大。一般认为，在细胞生长中如果核质比率降低到一定程度时，则细胞将发生分裂。
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微核实验在染色体水平检测 DNA 损伤实验
micronucleus， C B M N ) 有较好的精确性，因为获得的数据不会被由细胞毒性试剂或者非理想的细胞培养条件引起的细胞分裂动力学改变所混淆。这种方法现在已被用于多种细胞以检测群体中的遗传损伤，筛检化学物的潜在遗传毒性和其他特殊目的如预测肿瘤对放射的敏感性和个体间对放射的敏感性差异。应用目前的基本研究方法，通过简单的形态学标准， CBMN 实验能够用于以下检测：染色体断裂、染色体丢失、染 色 体 重 组（nucleoplasmic b rid g e , 核质桥）、 基 因 扩 増（nuclear bud
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体细胞核移植
动物细胞核移植（nuclear transfer／nuclear transplantation）是指通过显微操作的方法，将供体细胞的细胞核放入预先去核的成熟卵母细胞或早期合子内，形成一个新的核质重组体，重组体经过分裂、分化，并在母体内发育成一个新的个体。细胞核移植依据供体细胞的来源不同，可分为胚胎细胞核移植（embryonienuclear transfer），胚胎干细胞核移植（embryonie stem cell nuelear transfer）和体细胞核移植（somatie cell
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诱变物质的微核测定实验
冲洗三到五遍，再培养过夜后，用固定液固定待用。3、、挑取适当经诱变后的幼根，换以70%，50%，30%酒精中各10分钟，蒸馏水冲洗两次。4、60℃1NHCL中3-5分钟，再放入1N冷HCL中1分钟，取出用清水稍微冲洗后，置载玻片上，滴少量染色液，盖上盖玻片，轻轻敲打，使根尖细胞分散，置显微镜下观察。5、对照以下图片说明，比较所观察到的结果。图片说明：1，微核，; 2 小核，；3，双核，；4，核出芽；5，核缢缩；6，核耳；7，桥+落后染色体；8，桥+染色体断片；9双桥；10，多桥；11游离染色体，12染色
操作方法所属实验：诱变物质的微核测定实验
电泳
一、垂直电泳SDS 和常规聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳的方法基本相同。将缓冲液贮液稀释一倍便为连续电泳的电极缓冲液。不连续 SDS 电泳的电极缓冲液常用 Tris-甘氨酸系统（0.025 mol/L Tris，0.192 mol/L 甘氨酸，0.1% SDS，pH 8.3 )。二、水平电泳和常规聚丙烯酰胺凝胶电泳一样，SDS 水平电泳目前也有三种方式，即经典的搭接滤纸桥的方式和二种半干方式。前者操作麻烦，电泳时间长。半干技术在保证分辨率的前提下，电泳时间只需 1 小时（分离距离 8 cm)，且节省
操作方法所属实验：SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳
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