内参就是内部参照，一般是指管家基因编码表达的蛋白，它们在各个组织和细胞中的表达相对恒定，在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照参。内参则可以校正蛋白质定量、上样过程中存在的误差，保证实验结果的准确性。 此外，内参可以作为空白对照，还可以检测蛋白转膜情况是否完全、整个 WB 显色发光体系是否正常。内参抗体种类很多，比如 β-Actin、β-Tubulin、GAPDH 等，下面简单介绍下如何选择内参。 一、目的蛋白分子量 选择内参抗体时，应该考虑目的蛋白分子量的大小。通常应该保证目的

myskite u6序列很多，用哪个都可以吗？ detector350 在做microRNA相对定量检测时候，一般选用U6或者5s。 myskite 我想自己设计u6的反转引物，嗯，有设计好的吗？ detector350 他们那边有的，你可以发邮件询问下 kiss9499 没有，直接买的试剂盒

WB 已然成为蛋白实验中的「大众情人」技术，然其步骤繁琐，处处是坑，错一步而全盘皆输。不同 level 的科研狗在享受它魔力的同时，也被折磨的心力交瘁。为彻底驯服 WB，获得教科书级的亮瞎眼条带，内参君的选择是首先需要考虑的。内参君何许人也？所谓内参君，一般是指由管家基因编码表达的蛋白，因其恒定表达，故而可作为完美的参照物，来矫正蛋白定量、上样过程中存在的实验误差，保证实验结果准确性。不是人人可做内参君（内参君的选择标准）√ 分子量大小：内参蛋白与目的蛋白分子量需要有一定差异。例如， 如果需要

荧光定量 PCR 的主要用途之一是相对定量，而提到相对定量，必然离不开内参，那什么是内参基因？为什么相对定量必须使用内参？如何选择正确的内参基因？今天，我们就来聊聊关于内参的那些事。 什么是内参？ 内参基因，也称为管家基因，其编码蛋白是维持细胞基本生命活动所必须的蛋白质。它的表达水平不受任何内源性与外源性因素的影响。管家基因高度保守且在大多数情况下持续表达，稳定表达于不同类型的细胞和组织中。 为什么相对定量必须使用内参？ 那内参基因与相对定量又有什么样的关系呢？我们通过以下实验案例一起

内参照定量PCR PCR可分析极微量的DNA，并可同时扩增多种序列，已应用于基因转录水平的研究。尽管PCR是一种较理想的核酸定量方法，但实验方案的选择对PCR定量的成功与否极为重要，因为PCR是一个指数过程，控制反应率的任一参数的微小变化都会显著影响产物的生成量，在这些参数被精确优化与控制后，也还可能出现不同反应管中的产物量的差异，而导致结果的偏差。 设置内参照是理想的定量方法，它使定量测定mRNA工作变得较为简单易行，这一类方法已较为广泛地应用，下面介绍两种常用的方法