定量PCR

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

定量PCR可以用于：

（1）以外参或内参为标准，通过对PCR终产物的分析或PCR过程的监测，进行PCR起始模板量的定量；（2）用外标法（荧光杂交探针保证特异性）通过监测PCR过程（监测扩增效率）达到精确定量起始模板数的目的，同时以内对照有效排除假阴性结果（扩增效率为零）。

来源：丁香实验

操作方法

定量PCR

一、材料1. 缓冲液与溶液10X 扩增缓冲液4 种 dNTP 贮存液（20 mmol/L，pH 8.0)MgCl2 ( 50 mmol/L)胎盘 RNase 抑制剂（20 单位/ul）2. 酶与缓冲液合适的限制性内切核酸酶反转录酶（100~200 单位/ul）热稳定 DNA 聚合酶3. 放射性物质[α-32P] dCTP（放射性比活度：3000 Ci/mmol) 的浓度为 10 mCi/mI4.