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western blot 内参不齐的原因及改善方法?

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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材料与仪器

蛋白样品

步骤

原因:

  1. 内参与待检测蛋白质的表达水平不同;
  2. 内参和待检测蛋白的尺寸和分子量不同可能导致它们在电泳和转移过程中的运移速度不同;
  3. 技术问题:在所使用的薄膜、抗体和染色试剂等技术参数方面的差异会导致内参不均一。

对策:

  1. 选择特异性高、表达量适中的内参蛋白;
  2. 调整待测蛋白质的负载量;
  3. 尽可能选择使用相同的技术参数,减少技术差异导致的内参不齐。

来源:丁香实验

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