这些内参设置的潜规则，你都知道吗？
丁香园
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WB 已然成为蛋白实验中的「大众情人」技术，然其步骤繁琐，处处是坑，错一步而全盘皆输。不同 level 的科研狗在享受它魔力的同时，也被折磨的心力交瘁。为彻底驯服 WB，获得教科书级的亮瞎眼条带，内参君的选择是首先需要考虑的。
内参君何许人也？
所谓内参君，一般是指由管家基因编码表达的蛋白，因其恒定表达，故而可作为完美的参照物，来矫正蛋白定量、上样过程中存在的实验误差，保证实验结果准确性。
不是人人可做内参君（内参君的选择标准）
√ 分子量大小：内参蛋白与目的蛋白分子量需要有一定差异。例如， 如果需要检测自噬 marker LC3B（~14-17 kDa），则应避免使用 Cofilin 或 Cyclophilin B（~20 kDa）这些分子量与目标蛋白接近的内参蛋白。
√ 表达水平：选择的内参蛋白需要在待测样本中是高表达的。常用的内参蛋白是由管家基因高表达的，是细胞发育和维持细胞活力所必须的。例如，细胞核的内参蛋白 PCNA，在 DNA S 期表达，因此对于非增殖细胞不推荐使用。
√ 表达因素：选择表达不受实验变量影响的内参，例如，细胞应激反应中 HSP60 会表达上调，因此在研究细胞应激实验中，应该避免使用 HSP60 作为内参蛋白。
高曝光率内参君大阅兵
养兵千日，看内参君三步法亮剑
