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免疫组化(IHC)
专题61 内容  1332 订阅
免疫组化
免疫组化(Immunohistochemistry, IHC)是应用免疫学基本原理--抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理。通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学技术(Immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(Immunocytochemistry)。
实验概况收录 9 操作方法 · 2 相关问答 · 3 相关文章
SPA 在免疫组化中的应用
SPA 可为多种示踪物(如荧光素、酶、胶体金、铁蛋白)所标记,应用较广泛的为酶标记 SPA 和金标记 SPA 技术。标记 SPA 常用的酶为 HRP,可应用于间接法染色,SPA 在 PAP 法中可代替桥抗体。内容来源《免疫组织化学实验技术及应用》
实验概况收录 2 操作方法 · 3 相关问答 · 3 相关文章
免疫组化
通过特异的抗原抗体反应标记上可见的显示物系统来检查细胞及组织上原位抗原或抗体成分的方法。在光学显微镜、荧光显微镜或电子显微镜下观察其性质定位,还可以利用细胞分光光度计、图像分析仪、共聚焦显微镜等进行细胞原位半定量测定。免疫组织化学的显著特点是特异性强。
操作方法所属实验:小鼠脑片免疫组织化学(ABC 法)实验
免疫组化(荧光)实验
免疫组化(荧光)实验的基本过程可分为如下几步:A. 组织切片置于二甲苯中浸泡 10 分钟或更久,更换二甲苯后再浸泡 10 分钟以上。B. 无水乙醇中浸泡 3~5 分钟。C. 95% 乙醇中浸泡 3~5 分钟。D. 70% 乙醇中浸泡 3~5 分钟,蒸馏水洗。E. 3% 过氧化氢孵育 10~30 分钟,以灭活内源性过氧化物酶活性。F. 蒸馏水冲洗,PBS 浸泡 5 分钟。G. 采用抗原修复:蒸锅修复 30 分钟,自然冷却。H. 血清封闭:室温 15~30 分钟,与二抗来源一致。弃去,勿洗
操作方法所属实验:免疫组化(荧光)实验
实验问答1726 围观
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进阶:6 年免疫组化经验总结

一、石蜡切片和冰冻切片的比较? 1、要求做冰冻切片的不一定能做石蜡切片,这是我向一老师请教得出的结论。因为作石蜡切片时要高温烤片,可能会破坏组织的抗原性,如果组织的抗原性较稳定,则可作石蜡切片;但是要求做石蜡切片的,可作冰冻切片。   2、冰冻切片的优点是能够较好的保存组织的抗原免疫活性,做免疫组化时不需抗原修复这一步。缺点是细胞内易形成冰晶而破坏细胞结构,可能会使抗原弥散;切片厚度较石蜡的厚,做的片子没石蜡的漂亮。当你买一抗时,目录上都写着做什么样的切片,如果它写着只能做冰冻,就不能做石蜡,如写

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免疫组化常见十大问题与解析

不完全,若存在,需延长脱蜡时间或换用新的二甲苯。 (5)抗原修复不完全:对于甲醛固定的组织必须用充分抗原修复来打开抗原表位,以利于与抗体结合。 (6)细胞通透不全,抗体未能充分进入胞内参与反应:可加入组织透化步骤,进行细胞膜或核膜的透化。 (7)试剂盒保存不当:请于 4℃ 进行保存,勿室温防止过长时间。 (8)封闭时间过长:若使用封闭液进行封闭,请排除封闭液对抗原抗体结合的影响。 Q2:免疫组化染色弱怎么办? (1)抗体浓度过低,孵育时间过短:可提高抗体浓度,进行抗体4℃过夜孵育。 (2)组织

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免疫组化全攻略手册
专题28 内容  219 订阅
石蜡切片免疫组化实验
免疫组化可应用于:(1)确定组织细胞内抗原 (多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究;(2)诊断异常细胞,指导治疗。
实验概况收录 5 操作方法 · 36 相关问答 · 3 相关文章
免疫组化(荧光)实验
通过组织学观察初步判断病理发展情况后,通常需要进一步在原位确认潜在的高/低表达分子,以推测病理表型的分子基础。此时就需要使用免疫组织化学的方法,定性/半定量地考察目的蛋白的表达情况。有时为了更精确地确定蛋白表达的确切位置,需要使用与标志蛋白共定位的免疫荧光手段实现多个分子共染,并在共聚焦显微镜下独立通道扫描叠加图像取得高分辨率的荧光共染结果。
实验概况收录 1 操作方法 · 1 相关问答 · 3 相关文章
免疫组化Elivison二步法
1、石蜡切片置于67℃烘箱中,烘片2小时,脱蜡至水,用pH7.4的PBS冲洗三次,每次3分钟(3×3’)。2、取一定量pH=6.0柠檬酸盐缓冲液,加入微波盒中,微波加热至沸腾,将脱蜡水化后的组织切片置于耐高温塑料切片架上,放入已沸腾的缓冲液中,中档微波处理10分钟,取出微波盒流水自然泠却,从缓冲液中取出玻片,先用蒸馏水冲洗两次,之后用PBS冲洗2×3’。(注:不是所有的抗体都需要微波修复的,视具体情况而定)3、每张切片加1滴3%H2O2,室温下孵育10分钟,以阻断内源性过氧化物酶的活性。PBS
操作方法所属实验:免疫组化
🔥 免疫组化主要步骤
1. 洗载玻片: 将载玻片置于重铬酸钾和浓 H2SO4 混合液中, 目的是为了是载玻片上的硅胶等除去, 同时使一些肉眼看不见的凹凸不平的表面变平整, 便于组织吸 附, 然后置于清水中清洗, 除去残余的重铬酸钾和浓 H2SO4(大约冲一个小时左右), 再将载玻片浸泡于酒精之中, 然后放到架子上, 置于 37 °C 温箱中,将多聚赖氨酸涂布于玻片的表面,由于 Lys 带正电,而大多数的组织带负电荷,从而产生吸附作用。2. 包埋组织: 先在铁模具中加入一些液态石蜡,先稍微冷却,然后再将待包埋的组织
操作方法所属实验:免疫组化
实验问答1952 围观
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【求助】免疫组化与IKB

管树军621 各位大侠,我在论坛上看到大家检测NF/KB与IKBa用的都是WB的方法,我想用免疫组化的方法,好出结果吗,两者相比那种方法更容易出结果呢?我只想只一个好出结果的方法并且试剂相对便宜一些。谢谢!请高手指点。我的邮箱是guanshujun621@163.com 00501101 如果你是硕士的话,可以骗过国内的人,蒙混过毕业就行了 如果你是博士的话,要发SCI,请不要用组化代替wb,老外没有人这样代替

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免疫组化主要步骤

免疫组化主要步骤 1. 洗载玻片:将载玻片置于重铬酸钾和浓H2SO4混合液中,目的是为了是载玻片上的硅胶等除去,同时使一些肉眼看不见的凹凸不平的表面变平整,便于组织吸 附,然后置于清水中清洗,除去残余的重铬酸钾和浓H2SO4(大约冲一个小时左右),再将载玻片浸泡于酒精之中, 然后放到架子上,置于37°C温箱中,将多聚赖氨酸涂布于玻片的表面,由于Lys带正电,而大多数的组织带负电荷,从而产生吸附作用。2.包埋组织:先在铁模具中加入一些液态石蜡,先稍微冷却,然后再将待包埋的组织置于石蜡之中

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β-半乳糖苷酶活性的整体封片免疫组化检测实验
来源:《精编分子生物学实验指南》第五版
实验概况收录 2 操作方法 · 2 相关问答 · 3 相关文章
小鼠脑片免疫组织化学(ABC 法)实验
了解免疫组织化学实验原理,熟练掌握实验操作步骤。(神经生物学实验讲义;杜继曾,陈学群主编;2004.09)
实验概况收录 1 操作方法 · 2 相关问答 · 3 相关文章
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