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简介
来源:丁香实验
操作方法
1)在冰冷的PBS里解剖胚胎或组织。置β-半乳糖苷酶固定剂,室温至合适的时间。以下是固定小鼠胚胎和组织的指导:外植体和E 6.5到E 7.5胚胎5〜10 min; E 8到E 9.5胚胎或尾巴切面 15〜30 min; E 10 到 E 12.5 胚胎 30 min〜1.5 h; E 13 到 E 14.5 胚胎 2 h; E 15.5 或更大的组织则需要解剖出来或切一半,然后固定2 h。新生幼鼠
准备大组织的厚切片进行β-半乳糖苷酶染色1) 固定和洗涤组织。2) 将组织放置在100 mL烧杯中,用吸管轻柔吸取大部分的洗涤缓冲液。在37〜40℃加入足够的4%中等强度的琼脂糖覆盖组织(让烧杯倾向于组织这边)。旋动烧杯混匀并使充分覆盖组织。3) 室温将烧杯放置成45°角直到琼脂糖变硬(约10 min)。4) 用一刀片调整琼脂糖块使之成方形,每边留出2〜3 mm。5) 用氰基丙烯酸盐粘合剂在合适的方向(如冠状切面)粘住琼脂糖块,使之粘到
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