细胞培养过程中碰到的小黑点,到底是什么啊，一直都有

在细胞培养中常可见到细胞及培养液中有一些大小不等、形态不同的黑色未知颗粒。

有可能是细胞碎片或者污染如：支原体、真菌和寄生虫等

大概率是血清不好，导致细胞状态差，只要实验组和对照组都有，结果也符合预期，就凑合着吧，要不就买好血清

不动的小黑点，细胞碎片或支原体污染

解决办法：细胞出现黑点一般判定为细胞碎片或杂质，可参照以下进行：

如果是悬浮细胞：收集细胞上清慢速离心（500-600 rpm/min，5-6 min）并更换新的培养瓶。

如果是贴壁细胞：将细胞用PBS洗2-3遍，洗的时候，轻轻拍打培养瓶，让贴壁不牢的碎片和颗粒脱落，再弃去PBS，消化时先加低浓度的胰酶如0.05%胰酶消化1 min左右，让细胞间隙中的颗粒和碎片脱落下来，去掉低浓度胰酶，然后正常消化细胞，将收集的细胞悬液慢速离心（500-600 rpm/min，5-6 min）并更换新的培养瓶，并可以尝试适当增加血清浓度进行培养。

如果怀疑黑点是支原体污染，可进行支原体检测，检测阳性请及时将细胞处理后丢弃。比较珍贵的细胞，可以尝试使用支原体清除剂（如泰乐菌素等）去除，并与其他细胞分开培养。

可能是：

1、细胞碎片

2、凋亡小体

3、血清中的沉淀

4、黑胶虫

5、支原体污染

需要具体分析判断

细胞出现黑点一般判定为细胞碎片或杂质，可参照以下进行：

如果是悬浮细胞：收集细胞上清慢速离心（500-600 rpm/min，5-6 min）并更换新的培养瓶。

如果是贴壁细胞：将细胞用PBS洗2-3遍，洗的时候，轻轻拍打培养瓶，让贴壁不牢的碎片和颗粒脱落，再弃去PBS，消化时先加低浓度的胰酶如0.05%胰酶消化1 min左右，让细胞间隙中的颗粒和碎片脱落下来，去掉低浓度胰酶，然后正常消化细胞，将收集的细胞悬液慢速离心（500-600 rpm/min，5-6 min）并更换新的培养瓶，并可以尝试适当增加血清浓度进行培养。

如果怀疑黑点是支原体污染，可进行支原体检测，检测阳性请及时将细胞处理后丢弃。比较珍贵的细胞，可以尝试使用支原体清除剂（如泰乐菌素等）去除，并与其他细胞分开培养。