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同源重组的原理是什么呀 同源臂是什么呀?为什么同源重组的酶可以不用考虑目的片段上有没有呀

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4 个回答

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汤姆卜丽波

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同源重组又称一般性重组。同源重组发生在DNA的同源序列之间,通过配对、链的断裂和再连接,而产生片段交换的过程,是最基本的重组方式,同源臂是指两个DNA片段之间的相似性,主要是因为有同源序列,所以不同考虑目的片段

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huarenqiang5

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同源臂是指DNA双螺旋结构中,同源染色体的两条单链互为同源臂,每条单链上与相邻的单链互为保护碱基。同源染色体是指在减数分裂过程中,联会紊乱而形成的,在形态、大小、遗传物质等方面保持恒定的染色体,同源臂指的是来自同一祖先的染色体,可以用来进行亲子鉴定。

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sswei

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同源重组是指两段DNA序列在部分或完全同源的情况下,在体外进行重组或修复的过程。在质粒构建中,同源重组常常用于构建特定序列在3'或5'端带有限定酶切位点的质粒。其基本原理如下:

1.设计引物和扩增片段:根据需要构建的质粒和目标DNA序列,设计引物使其能够扩增目标DNA序列。在设计引物时,通常需要在引物的3'端或5'端添加限制酶切位点,以便后续的克隆操作。

2.扩增目标基因片段:使用PCR等方法扩增目标基因片段,并加入上述设计好的限制酶切位点。

3.线性化质粒:将构建好的质粒通过所需限制酶酶切,使其线性化。

4.同源臂的连接:将扩增出的目标基因片段与线性化的质粒连接起来。连接过程中,由于同源序列的存在,会使目标序列与质粒DNA发生同源重组,将目标序列片段插入到质粒中。

5.质粒的筛选:将重组后的混合物转化到大肠杆菌等宿主体内,通过各类筛选手段,如抗生素筛选、酶切鉴定等,筛选出含有目标片段的正确质粒。

通过同源重组构建质粒的方法,可以使得质粒的克隆效率更高、更方便。同时,由于某些基因片段的序列相似性较高,同源重组过程中第二次重组的时间和效率远高于第一次,因此,同源重组在质粒构建及修饰等方面有着重要的应用价值。


同源臂是指两个DNA片段之间的相似性,它们可以通过特定的技术来检测和比较。同源臂类似于tRNA氨基酸臂的结构,是指一段同源序列,可以存在于同一物种不同个体间或不同物种间相同或相似的DNA序列中。


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loveliufudan

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同源重组(homologous recombination)是指两个同源的DNA分子片段在同源区互换而形成新的DNA分子的过程。它依赖于同源臂(homology arm),即两个DNA分子同源区的DNA序列。


同源重组的原理是:


1. 两个DNA分子在同源区具有相同或相似的核苷酸序列,这使得它们之间可以发生碱基配对并形成双链DNA。


2. DNA双链酶等酶可以识别并切断这两个DNA分子的双链区域。


3. 被切断的同源臂可以与另一个DNA分子的同源臂连接,两端连接后形成一个新的重组DNA分子。


4. DNA聚合酶可以修复重组过程中产生的单链区域,最终完成同源重组。


同源臂是参与同源重组的两个DNA分子同源区的DNA序列。其具有相同或高度相似的核苷酸序列,这使得它们可以发生同源配对,进而被同源重组酶识别和处理。同源重组酶如DNA双链酶可以识别同源臂的序列并在其中切断双链,而不需要考虑同源臂外的DNA序列,这是因为同源臂的同源性决定了它是同源重组的作用区域。


所以,同源重组酶之所以可以不考虑目的片段 DNA 序列,原因是它们作用的主要目标是同源臂区域的双链DNA,而不直接作用于整个 DNA 分子。同源臂序列的同源性决定了其是同源重组发生的关键区域,同源重组酶识别和切割的也主要是同源臂内的双链 DNA。所以,只要存在同源的同源臂,同源重组酶就可以发生作用,而不必考虑同源臂外 DNA 片段的具体序列。


同源重组是一个自然存在的重要遗传变异机制,在进化和基因工程中具有重要作用。利用同源重组的原理可以实现 DNA 的重组,这为基因治疗和转基因提供了重要的技术基础。

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