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科研学霸天团,48小时有问必答
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3T3-l1做诱导分化,到后面细胞飘得就越来越多,试了换小枪头轻柔的加,还是会飘得比较多,请问各位还有没有其他什么办法可以让细胞那么厉害
loveliufudan
以下是一些建议,可以尽量减少细胞飘动问题:细胞密度:确保在开始诱导分化之前,细胞密度达到适当的水平。一般来说,3T3-L1细胞在形成完整的单层且过密度的情况下(称为“过度传代”)才能有效地分化为脂肪细胞。当细胞密度过低时,细胞间的相互作用会减弱,导致细胞更容易脱落。诱导分化时培养液的更换:在分化过程中,尽量减少或避免不必要的培养液更换。在更换培养液时,轻柔地沿着培养瓶壁斜向加液,避免直接将培养液吹
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问
细胞复苏3天后出现这种黄色斑块的是污染吗?培养基不混浊,但感觉细胞生长比较缓慢,不确定这是不是污染
汤姆卜丽波
像是霉菌,细胞状态也不太好,你试着下次复苏加一点三抗
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问
染色体制片效果和实验室温湿度等环境因素的关系?
loveliufudan
环境因素确实可能影响到细胞制片过程中的质量。温度、湿度和环境稳定性在染色体制片过程中起着重要作用。以下是一些建议,以帮助您改善制片质量和避免外界因素的影响:控制实验室环境:在进行染色体制片实验时,尽量保持实验室温度和湿度相对稳定。如果可能,为实验室安装空调和加湿器以保持恒定的温度和湿度。在恶劣天气条件下(如高湿度),尽量避免进行实验。标准化固定液浓度:在制片过程中,确保使用适当浓度的固定液。过高或
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问
小鼠细胞培养过程中,换培养瓶后,发现培养瓶底部有模糊的黄褐色絮状物,这是什么原因造成的?
毛利小五郎的徒弟
黄褐色絮状物可能是细胞培养底部缺氧造成的细胞无氧代谢产物,建议及时给细胞换液清除黄褐色沉淀。
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问
MDA-MB-453,BT474,SKBR-3,JIMT-1 细胞周期分别怎么样啊,多久传一次代,几天换一次液呀?
汤姆卜丽波
这几个我们课题组有人在养,一般都是两天传代,一传二,换液就是什么时候培养基黄了就换
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问
神经原代细胞凋亡检测都有信号,为什么没有特异性?
晴空a
因为神经细胞的凋亡时有基因的选择性,所以无特异性。
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问
细胞培养问题求助??
AnythingGoes
大概率是黑胶虫污染,看培养基是否浑浊,如果浑浊可能是细菌污染
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问
水凝胶用于细胞培养时一定要冻干吗?
毛利小五郎的徒弟
固化的水凝胶也可以用于细胞培养。
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问
基因过表达成功但细胞迁移或增殖就是没趋势是否可以判定该基因不具有相应功能?
loveliufudan
仅仅通过基因过表达成功但细胞迁移或增殖没有趋势,不能完全判定该基因不具有相应功能。这可能是由于多种原因导致的,如实验条件、细胞类型、转染方法、检测方法等等。首先,建议检查实验条件是否一致,例如培养基是否相同,细胞密度是否一致,细胞处理时间是否相同等等,这些因素对实验结果会有很大的影响。其次,细胞类型可能对实验结果有较大的影响。不同细胞类型在迁移和增殖的能力上存在很大的差异,因此可能需要在不同的细胞
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问
大鼠CD4+ T细胞分离和培养问题求助?
sswei
可以选用磁珠分离CD4+T细胞较好。体外培养基是用RPMI-1640
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问
培养贴壁细胞发现培养基浑浊,细胞状态还可以,但是有小沙砾状的东西,是什么污染呢??
BudPlum
首先培养基浑浊是因为污染,其次小沙粒状应该考虑细菌感染。
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问
DSS蛋白寡聚化实验请教🥺
dxy_rwzqgvz0
我也出现了这种情况,再加点DMSO溶解以后,加loading buffer煮样吗
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问
培养皿里面已经出现细胞团块了,是不是已经开始影响后续实验了?
z流沙z
看细胞状态如果还好的话,应该问题不大
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问
复苏细胞数量过少,是继续培养?还是重新复苏?
偶然必然BMC5
细胞培养需要的时间不一样,条件相同,继续培养再试试!
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问
请教个问题,如果培养箱里面有细胞污染,而且很多瓶污染,要不要清空,彻底消毒?
偶然必然BMC5
你这个问题原因很多,第一排除培养基污染及菌种的污染,三角瓶都有封口膜的,可以隔离大部分污染。第二再培养箱大消毒杀菌
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问
大鼠原代骨髓间充质干细胞培养时如何避免污染?近期提的一批细胞有两皿出现了污染。再请教大家,鉴定BMSC的经典marker有哪些?
sswei
细胞培养所用物品清洗、消毒要彻底,各种溶液灭菌除菌要仔细,并在取样检菌一周后确认无菌才能使用。同时,在无菌过滤操作中,随着滤过体积的增大,滤膜破损的可能性增加,故应选择最后过滤的液体进行检测。各种抗生素性质不同,对各种微生物的作用也不同,联合应用比单用效果好,预防性应用比污染后使用好。但反复使用抗生素会使微生物产生耐药性,且对细胞本身也有一定影响,因此为避免诱导抗药细菌,应定期更换培养系统中的抗生
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问
细胞实验,每次都出现大量细胞漂浮原因?
sswei
漂着的细胞可能是还没贴壁的活细胞,也可能是死细胞。可以再培养一段时间看看是否贴壁细胞数有所增加或者往培养基中多加一些血清来促进贴壁。可能由消化过度引起。如果一段时间后还是没贴壁,那说明细胞生活状态比较不好或者细胞死亡了。这可能是由于细菌污染引起的,由镜检观察视野中是否有杂菌判断。如果不是很珍贵的细胞,就重新复苏一管吧。
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问
转导后的CHO-K1,想问一下这是细胞碎片还是污染了?
sswei
在细胞培育的过程中发现有黑点生成,在镜下观察细胞,生长状态良好,与黑点呈现前相比。没有任何变化,那么,黑点的呈现可能与细胞生长过老,破碎的细胞残骸有关。
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问
细胞刮痕实验一般用多少血清的培养基?
sswei
一般用<2%血清培养基,在适当的时间点,如0,6,12,24小时后取出细胞,在显微镜下观察并拍照。
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问
病毒转化的肿瘤细胞是什么意思?
毛利小五郎的徒弟
不建议用msb1,msb1和ALVJ之间几乎不存在相关关系,没有意义。
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