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细胞实验,每次都出现大量细胞漂浮原因?

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天一湖医者

培养MDCK细胞,换液和传代时虽然有足够的细胞贴壁,但是每次都发现有大量细胞漂浮,换液后在镜下观察可以看到已经有许多细胞有漂浮的趋势,想请教一下可能是什么原因?

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7 个回答

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sswei

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漂着的细胞可能是还没贴壁的活细胞,也可能是死细胞。可以再培养一段时间看看是否贴壁细胞数有所增加或者往培养基中多加一些血清来促进贴壁。

可能由消化过度引起。如果一段时间后还是没贴壁,那说明细胞生活状态比较不好或者细胞死亡了。这可能是由于细菌污染引起的,由镜检观察视野中是否有杂菌判断。如果不是很珍贵的细胞,就重新复苏一管吧。

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z流沙z

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pbs和培养基等要温浴,传代的时候注意控制消化时间

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毛利小五郎的徒弟

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我们一般主张在原代细胞生长3天左右换液

换液的时候动作要轻和小心

液体从冰箱里拿出后要在室温“预热”

否则由于在换液时由于操作失误液体过冰会导致细胞漂浮脱壁

一般在这个时候仅换1/3的液体

换液3天后再半量换液

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申东熙老伯

有帮助

换液时可以把培养基沿培养瓶或皿的壁轻轻吹进去,不要碰到细胞。

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Dr_劉医生

有帮助

可能原因有很多,以下是一些常见的原因:

  • 细胞密度过高,导致细胞无法附着在培养皿上。
  • 培养基中含有过多的蛋白质或脂质,导致细胞聚集在一起。
  • 培养皿表面不干净,存在细菌或真菌等污染物。
  • 培养条件不合适,如温度、CO2浓度、培养时间等。
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loveliufudan

有帮助

MDCK细胞的漂浮现象可能由以下因素导致:

细胞密度过高:细胞密度过高可能导致细胞之间缺乏足够的营养和空间,从而促进细胞脱落和漂浮。因此,建议在细胞密度达到80%时进行传代,以避免细胞密度过高。

细胞粘附能力差:MDCK细胞粘附能力较弱,如果培养条件不适宜,如培养皿涂层不够均匀或者不够黏附性,可能导致细胞脱落和漂浮。可以尝试更换培养皿、涂层材料或者调整涂层时间和方法等,以提高细胞粘附能力。

培养条件不稳定:培养条件的不稳定可能会影响细胞的生长和粘附能力,例如培养温度、二氧化碳浓度、培养基成分等。因此,建议使用稳定的培养条件,并且在细胞培养期间尽量避免操作和震动培养皿。

污染:细胞培养过程中的污染也可能导致细胞脱落和漂浮。建议使用无菌技术进行细胞培养,并注意消毒和清洁工作,以避免细菌和真菌等微生物的污染。


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balalaLy

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细胞状态不好,可能是有支原体污染或者细胞老化

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