DSS蛋白寡聚化实验请教🥺
LZY_ycxt
请问各位前辈，DSS交联完后细胞出现了粉末一样的东西，离心后这些粉末沉淀用loading buffer煮也融不了，跑SDS-PAGE的话完全没有条带，是怎么回事呢？同时处理的DMSO组就没有粉末状的东西，沉淀也能够用loading buffer煮融，跑胶也有条带。请问各位大佬知道怎么回事么？
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3 个回答
dxy_rwzqgvz0
有帮助
我也出现了这种情况，再加点DMSO溶解以后，加loading buffer煮样吗
是TTT
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再用dmso溶解一下呢，因为dss交联剂溶于DMSO，可能是处理或者加热过程中它析出来了
来一起探讨
有帮助
DSS胶联剂处理后在细胞培养基或水中不溶解，会出现粉末沉淀，用于电泳不难以出现条带，在有机溶剂中可以溶解，所以用DMSO处理过后，没有出现粉末沉淀，并可以用于电泳。
LZY_ycxt
DSS事先是用DMSO溶解的，然后PBS重悬了细胞，加入终浓度2mM的DSS之后就出现了粉末一样的东西，最后离心去除上清留下pellet，加loading煮pellet的时候那些粉末一样的就煮不溶了
来一起探讨
在加DSS时，要把细胞中的培养基洗涤干净，否则含胺组分会出现淬灭反应，产生粉末。还要注意DSS的配置，现配现用。
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