材料与仪器
步骤
取 20 mg 异硫氰酸荧光素,加 20 ml 无水乙醇,使 FITC 充分溶解,即为染色液的原液,保存于 4℃ 冰箱待用。具体荧光染色步骤如下:
1. FITC 贮存液的稀释:用 pH 7.4 的 PBS 液稀释成 50 ug/ml 浓度的工作液,备用。
2. 被染色细胞首先用 70% 酒精破膜,作用 10 min,使 FITC 染料能进入到细胞中。
3. 用离心法以 PBS 液洗去破膜剂,离心收集细胞。
4. 再取 FITC 工作液 2 ml 加入样品中,混匀,置 4℃ 冰箱中反应 30 min。
5. 用 PBS 液以 1500 r/min 离心 5 min,洗去染色液,再离心去上清。
6. 再加 0.5 ml PBS,混匀,上机检测。
1. FITC 贮存液的稀释:用 pH 7.4 的 PBS 液稀释成 50 ug/ml 浓度的工作液,备用。
2. 被染色细胞首先用 70% 酒精破膜,作用 10 min,使 FITC 染料能进入到细胞中。
3. 用离心法以 PBS 液洗去破膜剂,离心收集细胞。
4. 再取 FITC 工作液 2 ml 加入样品中,混匀,置 4℃ 冰箱中反应 30 min。
5. 用 PBS 液以 1500 r/min 离心 5 min,洗去染色液,再离心去上清。
6. 再加 0.5 ml PBS,混匀,上机检测。
来源:丁香实验