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提取细胞蛋白时,浓度低如何解决

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QAQ10

提取100mm培养皿里的人间充质干细胞,使用lysis buffer裂解液,一般用小于100uL裂解液才能收到适合WB浓度的蛋白。是在提取的过程没有超声裂解所致吗?有没有解决办法?

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3 个回答

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whilt-shirt

有帮助

100mm的dish是可以加400-600ul的裂解液的,是不是细胞没刮导致浓度比较低

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Eason老歌迷

有帮助

可能是你没有用胰酶消化细胞,导致你细胞没有收集完。也可能是你的细胞本来数量就很少。可能是你没有在冰上裂解,蛋白降解了。

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天一湖医者

有帮助

1.增加细胞量,比如两瓶细胞一起提蛋白。

2.减少裂解液用量,比如200ul,浓度可能会加倍。

3.延长裂解时间,并且反复吹打,10min吹打一次。

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