蛋白水解度测定，如何操作？

蛋白水解度测定，常用方法是茚三酮法，利用待测蛋白样品完全水解液做为茚三酮比色的标准样品测定蛋白质的水解度。 水解度（ Degree of hydrolysis，DH）代表水解过程中蛋白质肽键被裂解的程度，常用百分数来表示：DH =h/htot× 100%式中，h是水解后每克蛋白质被裂解的肽键数，毫摩尔数（mmol/g）。htot是每克原蛋白质中的肽键毫摩尔数（mmol/g），注意，当蛋白质特指时htot是一个常数，比如酪蛋白质的htot为8.2mmol/g;还可以根据组成蛋白质的氨基酸（组成成分）含量来计算，如大豆分离蛋白的htot为7.8 mmol/g。一般地，由于每裂解一个肽键就可同时生成一个-NH2和一个-COOH，所以，只要定量地测出-NH2和-COOH基团的量即可知道h值。也就是说，只要测出水解后蛋白质被裂解的肽键数即h值，就能计算出相应的DH值。

可以。取3个25ml的锥形瓶，编号。向1、2号瓶内各加入0.05mol/L标准甘氨酸溶液2ml和水5ml，混匀。向3号瓶内加入7ml水。然后向三个瓶中各加入5滴酚酞指示剂，混匀后各加2ml甲醛溶液再混匀，分别用0.02mol/L标准氢氧化钠溶液滴定至溶液显微红色。重复以上实验两次，记录每次每瓶消耗的标准氢氧化钠溶液的毫升数。取平均值，计算甘氨酸氨基氮的回收率。 取未知浓度的甘氨酸溶液2ml，依上述方法进行测定，平行做几份，取平均值。计算每毫升甘氨酸溶液中含有氨基氮的毫克数。