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3T3-l1做诱导分化,到后面细胞飘得就越来越多,试了换小枪头轻柔的加,还是会飘得比较多,请问各位还有没有其他什么办法可以让细胞那么厉害

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巴啦啦能量-wy


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2 个回答

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loveliufudan

有帮助

以下是一些建议,可以尽量减少细胞飘动问题:

细胞密度:确保在开始诱导分化之前,细胞密度达到适当的水平。一般来说,3T3-L1细胞在形成完整的单层且过密度的情况下(称为“过度传代”)才能有效地分化为脂肪细胞。当细胞密度过低时,细胞间的相互作用会减弱,导致细胞更容易脱落。

诱导分化时培养液的更换:在分化过程中,尽量减少或避免不必要的培养液更换。在更换培养液时,轻柔地沿着培养瓶壁斜向加液,避免直接将培养液吹到细胞上。这样可以减少细胞的剥离现象。

使用较低的吸附力:在更换培养液时,可以使用低吸附力的吸管头,以减少细胞的剥离。

分化诱导剂的选择:请确保您所使用的分化诱导剂(如多巴胺,羟基糖皮质激素,胰岛素等)的浓度和比例是正确的。错误的诱导剂浓度可能会影响细胞的分化,并导致细胞脱落。

优化培养条件:细胞分化过程中可能对温度、CO2和湿度的要求更加敏感。请确保恒温培养箱条件适当,并定期对设备进行校准。

检查细胞是否感染或污染:确保您的细胞没有感染或污染。微生物污染可能会导致细胞脱落。如有污染,请处理污染源并使用无污染的细胞进行实验。


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毛利小五郎的徒弟

有帮助

3T3L1的分化对培养环境非常敏感,甚至是trypsin的质量都会影响分化。可以添加血清稳固体系,减少漂浮

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巴啦啦能量-wyuser-title

有没有推荐的血清稳固体系啊

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