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科研学霸天团，48小时有问必答

问什么是ac螺旋

loveliufudan

AC螺旋，实际上是指A螺旋和C螺旋组成的结构单元。C螺旋位于EGFR的中心区域，与A螺旋相邻。这种AC螺旋结构被认为在EGFR的结构和功能中起着重要作用，例如与EGF结合和受体激活等过程中都涉及到该结构单元。需要注意的是，由于EGFR结构是一个高度动态的体系，AC螺旋结构可能不是一成不变的，可能会受到多种因素的影响而发生变化。

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问想收集内皮祖细胞条件培养基用于培养内皮细胞

asswei

内皮细胞培养的时候对培养基的要求很高，必须要使用MCDB这种不是很常规的基础培养基，然后加血清，加EGF,加胰岛素才能好好生长。

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问软骨细胞提纯

Marchers

应该是死亡的细胞碎片。软骨细胞纯度可以用流式、台盼蓝染色等检测。软骨细胞提纯方法有很多种，其中一种是通过离心收集细胞，预冷1×PBS 500ul重悬洗一次，转至500ul EP管（2000rpm×5min），去上清，后甩一次，将上清去尽，按每1×106的细胞加50ul loading buffer 加入2×loading，Vortex一下，煮10～15min一次×2～3次直至无粘丝，每次煮好将其放

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问大鼠TAC主动脉弓缩窄术用多少G的针头？

毛利小五郎的徒弟

我一般选择26G的针头进行主动脉弓缩窄术，效果不错

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问乳鼠大脑HE染色的小小困惑

毛利小五郎的徒弟

考虑组织在水浴锅停留时间太长变性了,建议减少水浴时间

3 回答87 围观

问786-0细胞

毛利小五郎的徒弟

胰酶的浓度是多少，大量漂浮考虑消化过度，需要降低胰酶的浓度。

4 回答76 围观

问THP-1单用lps处理No值为什么和control差不多

毛利小五郎的徒弟

考虑是lps的浓度过大或者处理时间过长才会导致NO值变化这么大

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问请问各位大神这些黑点是支原体污染了吗？还是说是死细胞团呢？🙏

灰灰加油干

支原体肉眼看不见。目测应该是细胞团块。如果你的细胞生长缓慢，背景变脏，就需要考虑是不是支原体污染。可以使用PCR法或者试剂盒的显色法进行判断。

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问脑缺血再灌注的大脑中动脉阻塞阻塞模型做透射电镜切片取哪个部位最佳呢

Marchers

一般选择大脑皮质作为切片的部位。

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问请问在磁性活化细胞分选（MACS）试验中，剩余的未与细胞结合的磁珠如何与磁细胞分离开来？

Marchers

在MACS分选中，未与细胞结合的磁珠可以通过磁场分离。MACS分选是基于细胞表面抗原能与连接有磁珠的特异性单抗相结合，在外加磁场中通过抗体与磁珠相连的细胞被吸附而滞留在分选柱内，而无该种表面抗原的细胞由于不能与连接有磁珠的特异性单抗相结合而没有磁性，不在分选柱内停留，进而使细胞得以分离。因此，未与细胞结合的磁珠可以通过磁场分离。

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问YOCK抑制剂Y27632

loveliufudan

虽然RhoA是ROCK的上游调节因子，但是Y27632也被发现具有一定的抑制RhoA表达的作用，具体原因可能包括以下几点：Y27632对RhoA的转录和翻译过程具有一定的抑制作用，从而减少了RhoA的表达水平。Y27632还能够通过抑制细胞骨架蛋白的重组，降低RhoA的活性，从而降低RhoA信号通路的效应。此外，Y27632还能够影响一系列细胞信号通路的活性，包括PI3K/Akt、MAPK等，从而

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问96孔板中的细胞长满了，还能做药物实验吗（96孔板中细胞长得超级满的那种）

武金亮wu

最好不要，我之前就是长到90%，发现药物对其抑制作用减弱了，OD值也和之前的差距很大。虽然很麻烦还是建议重新铺板，时间把握不好的尽量稀一点。ps不知道你是做什么实验，如有错误请指出。

7 回答146 围观

问HepG2如何和肝星状细胞共培养？有哪些方法？

Marchers

HepG2和肝星状细胞的共培养方法有很多种，主要分为间接培养和直接培养。当您将HepG2和肝星状细胞分别培养时，您可以按照以下步骤进行：将HepG2和肝星状细胞分别接种在含有适当培养基的培养皿中。在37℃、5% CO2的恒温培养箱中培养细胞。收集细胞，将它们混合在一起。另一种方法是：将HepG2和肝星状细胞分别接种在含有适当培养基的培养皿中。在37℃、5% CO2的恒温培养箱中培养细胞。收集Hep

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问fresh hormone-deprived medium是什么，与无血清培养基SFM有什么区别？

Marchers

fresh hormone-deprived medium是指不含激素的培养基，而无血清培养基SFM是指不含血清的培养基。这两种培养基的区别在于，fresh hormone-deprived medium不含激素，而无血清培养基SFM不含血清。

3 回答96 围观

问脓毒血症细胞模型怎么提取？

Marchers

脓毒血症细胞模型的提取方法有很多种，其中一种是通过单细胞测序来提取。既往的研究也显示从脓毒症患者提取CD14+的单核细胞，其HLA-DR表达量较低。可以参考一下几篇文章：1、肺炎诱发脓毒血症的脓毒症患者的Treg / Th17，Th1 / Th2和M1 / M2细胞比率。2、早期研究已经证明组织因子-FVII7a在脓毒症相关模型中的关键作用。

2 回答153 围观

问求助联合药物干预细胞浓度

Marchers

建议A和B组各设置一个单药+空白的对照组，然后A+B联合组作为实验组，然后观察各组干预浓度的效果，以确定目标浓度

3 回答130 围观

问哪一种M2巨噬亚群可以降解胶原？

asswei

纤维化模型中，降解细胞外基质胶原应选M2a。

3 回答95 围观

问生物膜结晶紫染色清洗问题

Topmicro

固定好之后不要正对着生物膜部分冲一般都没问题

3 回答182 围观

问如何建立耐药细胞系

asswei

取处于对数生长期的肿瘤细胞（汇合度60%-80%），加入起始浓度为低浓度（建议为亲本细胞株的IC50的1/10-1/5）的药物作用24h，弃去培养液，PBS清洗2遍，更换不含药物培养基，细胞恢复生长后，消化传代复以低浓度作用细胞24h，待细胞增殖至正常形态后，重复上述药物冲击，每种浓度冲击6-8次。待细胞在此浓度稳定生长后，提高药物浓度继续培养，药物依次递增浓度加药。药物诱导历时6-8个月，直到细

3 回答90 围观

问细胞形态

loveliufudan

目测很可能是污染了，MDA-MB-231是一种人类三阴性乳腺癌细胞系，需要注意其易感性较高，容易受到外界污染物的影响。如果您的细胞在第三天出现了很多的飘浮细胞，那么您应该考虑细胞已经出现了污染。

3 回答111 围观

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